NLRP1 Lapin pAb pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9C000

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du NLRP1

• Le NLRP1 (protéine contenant les domaines NACHT, LRR et PYD 1) est une protéine multidomaine également connue sous le nom de CARD7, DEFCAP, NAC et NALP1. Il sert de composant capteur de l'inflammasome NLRP1, un complexe supramoléculaire qui s'assemble dans le cytosol en réponse à des signaux associés à des pathogènes et qui médie la pyroptose et la libération de cytokines inflammatoires. Références connexes : PMID:12191486, PMID:17349957, PMID:22665479, PMID:22801494, PMID:33852854, PMID:35594856
• Lors de l'activation, le NLRP1 recrute la pro-caspase-1 (proCASP1) via l'adaptateur PYCARD/ASC, déclenchant l'autoprotéolyse de CASP1. La CASP1 active clive pro-IL1B, pro-IL18 et la gasdermine-D (GSDMD), entraînant la sécrétion de cytokines et la mort cellulaire pyroptotique. Dans les contextes déficients en GSDMD, les inflammasomes NLRP1 peuvent engager CASP8 et la gasdermine-E (GSDME). Références connexes : PMID:12191486, PMID:17349957, PMID:22665479, PMID:33852854, PMID:35594856
• Le NLRP1 détecte divers signaux associés à des pathogènes et des dommages : les protéases 3C du rhinovirus humain clivent le NLRP1 pour l'activer ; l'ARN double brin (dsRNA) long agit comme un capteur direct ; l'irradiation UV-B induit des collisions ribosomales qui activent le NLRP1 via la phosphorylation de MAP3K20 ; et l'inhibiteur de la dipeptidyl peptidase Val-boroPro déclenche également l'inflammasome. Références connexes : PMID:33093214, PMID:33243852, PMID:35857590
• Le NLRP1 est traité de manière constitutive au sein de son domaine FIIND, produisant des fragments N- et C-terminaux associés de manière non covalente qui maintiennent un état auto-inhibé. Les signaux dérivés de pathogènes ou de dommages induisent l'ubiquitination et la dégradation protéasomique du fragment N-terminal, libérant le fragment C-terminal pour s'oligomériser et amorcer la formation de l'inflammasome. Références connexes : PMID:33093214, PMID:33731929, PMID:33731932
• L'expression tissulaire est large, avec des niveaux élevés dans les cellules immunitaires primaires (neutrophiles, monocytes/macrophages, cellules dendritiques, lymphocytes) et dans l'épithélium glandulaire des tractus gastro-intestinal, respiratoire et reproducteur. Il est également détecté dans la peau (kératinocytes, fibroblastes, follicules pileux), les neurones du cerveau et les cellules germinales testiculaires. Références connexes : PMID:11113115, PMID:17164409, PMID:15285719, PMID:23349227, PMID:27662089
• Au niveau subcellulaire, le NLRP1 se localise dans le cytoplasme, le cytosol et le noyau, et est recruté dans le complexe de l'inflammasome lors de l'activation. Il lie l'ATP et présente une activité ATPase, qui peut être nécessaire pour sa fonction. Références connexes : PMID:11113115, PMID:15212762, PMID:33243852
• Les rôles biologiques clés incluent l'immunité innée, la réponse inflammatoire, la défense antivirale et l'interaction hôte-virus. Les mutations du NLRP1 sont associées à des maladies auto-inflammatoires et à des dysplasies ectodermiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blotting, le NLRP1 a un poids moléculaire prédit d'environ 166 kDa. Utilisez un gel de polyacrylamide à faible pourcentage (par exemple, 6–8 %) et des temps de transfert humide prolongés (toute la nuit à basse tension) pour assurer un transfert efficace de cette grande protéine. Incluez un marqueur précoloré de poids moléculaire élevé comme référence.
• Pour l'IHC-P, la récupération de l'antigène (tampon citrate ou EDTA, induite par chaleur) est recommandée. Validez l'anticorps dans votre tissu d'intérêt (humain, souris ou rat) avec des témoins positifs et négatifs appropriés, et titrez pour minimiser le bruit de fond.
• Pour l'IF/ICC, optimisez la fixation (par exemple, 4 % de PFA) et la perméabilisation (par exemple, 0,1 % de Triton X-100) pour permettre l'accès à l'antigène principalement cytoplasmique/nucléaire. Le marquage simultané avec des marqueurs d'organites peut aider à confirmer la localisation.
• En tant qu'anticorps polyclonal, chaque lot peut présenter de légères variations ; nous recommandons des expériences pilotes pour établir les dilutions de travail optimales pour votre dosage et votre système d'échantillonnage spécifiques.

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