Anticorps polyclonal de lapin anti-NFS1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y697

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de NFS1

• NFS1 est une désulfurase de cystéine appartenant à la famille des aminotransférases dépendantes du phosphate de pyridoxal de classe V. Elle constitue le composant central fournissant le soufre au complexe mitochondrial d’assemblage des amas fer-soufre (ISC), catalysant la désulfuration de la L-cystéine en L-alanine et formant un intermédiaire persulfure sur la cystéine de son site actif (PubMed:18650437, PubMed:29097656, PubMed:31101807).
• Dans le cadre de la machinerie ISC, NFS1 transfère le soufre persulfure à la protéine échafaudage ISCU de manière dépendante de FXN afin d’initier l’assemblage des amas [2Fe-2S]. Le processus s’achève grâce aux équivalents réducteurs fournis par FDX2 et au transfert des amas vers les apoprotéines cibles, médié par des chaperonnes.
• Au-delà de la biogenèse des ISC, NFS1 agit comme donneur de soufre pour MOCS3 et participe à la biosynthèse du cofacteur du molybdène, ce qui met en évidence un double rôle dans des voies essentielles de transfert du soufre (PubMed:18650437, PubMed:23593335).
• La protéine se localise dans plusieurs compartiments subcellulaires : mitochondrie, cytoplasme, cytosol, noyau et centrosome, reflétant sa large distribution cellulaire.
• L’expression tissulaire est la plus élevée dans le cœur et les muscles squelettiques, avec une détection supplémentaire dans le cerveau, le foie et le pancréas.
• Les mots-clés et caractéristiques UniProt comprennent l’initiation alternative, l’épissage alternatif, le variant pathologique (COXPD52), la liaison au phosphate de pyridoxal et l’identification par protéomique.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 208–457 de la NFS1 humaine. Cette région se situe dans le domaine catalytique conservé, et l’anticorps obtenu peut reconnaître la NFS1 pleine longueur ainsi que potentiellement certaines isoformes d’épissage. Validez la spécificité dans votre système d’échantillons pertinent.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d’environ 50 kDa. Utilisez des contrôles de charge appropriés et vérifiez le profil des bandes dans le tissu ou la lignée cellulaire d’intérêt.
• En immunofluorescence et en immunocytochimie, prévoyez des profils de marquage mitochondrial et cytosolique. Un co-marquage avec des marqueurs d’organites est recommandé pour confirmer la localisation.
• L’ELISA peut être utilisé pour quantifier la NFS1 recombinante ou endogène. Optimisez les conditions de coating et la concentration d’anticorps à l’aide d’une courbe standard d’antigène connu.
• Une réactivité croisée est rapportée chez l’humain, la souris et le rat ; pour les autres espèces, un alignement de séquences in silico et des tests pilotes sont conseillés.

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