Anticorps polyclonal de lapin anti-NFKB1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P19838

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NFKB1

• NFKB1 code pour le précurseur p105, qui est traité de manière co-traductionnelle par le protéasome pour générer la sous-unité active p50 (PubMed:1423592). Références associées : PMID:1423592
• La sous-unité p50 forme des dimères NF-kB fonctionnels en s'associant à d'autres membres de la famille Rel, notamment l'hétérodimère p65-p50, qui agit comme un puissant activateur transcriptionnel (PubMed:1740106, PubMed:7830764). Références associées : PMID:1740106, PMID:7830764
• Les dimères NF-kB se lient spécifiquement à la séquence d'ADN consensus kappa-B (5'-GGRNNYYCC-3') située dans les régions amplificatrices des gènes régissant les réponses immunitaires, les réactions de phase aiguë, l'inflammation et la survie cellulaire.
• Dans les cellules non stimulées, NF-kB est séquestré dans le cytoplasme par les protéines inhibitrices I-kB ; lors de l'activation par divers stimuli, I-kB est phosphorylé et dégradé, libérant NF-kB pour entrer dans le noyau et réguler l'expression des gènes cibles.
• Le p105 pleine longueur fonctionne également comme un inhibiteur de type I-kB, retenant les protéines NF-kB associées dans le cytoplasme et modulant la signalisation MAPK en réprimant MAP3K8 jusqu'à ce que sa dégradation libère la MAP3K8 active.
• Les modifications post-traductionnelles clés de NFKB1 incluent la phosphorylation, l'acétylation, l'ubiquitination et la S-nitrosylation, qui affinent son activité transcriptionnelle et sa stabilité.
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique dans les cellules au repos et nucléaire lors de l'activation de la voie.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps, dirigé contre un peptide de la région N-terminale commune à p105 et p50, devrait détecter les deux formes ; en WB, attendez-vous à des bandes à ~105 kDa (p105) et ~50 kDa (p50) selon le type cellulaire et la stimulation.
• Pour l'IHC-P et l'IF/ICC, les conditions de récupération d'antigène et les méthodes de fixation peuvent nécessiter une optimisation ; envisagez de tester les modèles de coloration cytoplasmique et nucléaire.
• Vérifiez la spécificité de l'anticorps en utilisant des contrôles appropriés, tels que des lignées cellulaires avec extinction (knockdown) ou invalidation (knockout) médiée par siRNA.
• Pour les applications ELISA, confirmez que l'anticorps reconnaît les conformations protéiques natives dans votre matrice d'échantillon.
• Ajustez empiriquement les conditions de blocage et de dilution de l'anticorps pour votre système expérimental.

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