mAb de lapin anti-MYLK pour WB, ELISA - Q15746

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MYLK

• Le gène MYLK code pour la chaîne légère de la myosine kinase du muscle lisse (MLCK), une enzyme dépendante du calcium/calmoduline également connue sous le nom de protéine associée à la kinase (KRP) et télokine.
• Il phosphoryle les chaînes légères de la myosine (MLC) pour réguler la contraction du muscle lisse et module l'interaction actine-myosine par une activité non kinase.
• Il est impliqué dans les processus inflammatoires tels que l'apoptose, la perméabilité vasculaire, la diapédèse des leucocytes et l'hyperréactivité des voies aériennes associée à l'asthme.
• Il favorise la migration cellulaire et la métastase tumorale par des mécanismes incluant la formation de bulles membranaires dépendante de RhoA et l'activation du canal TRPC5.
• Il se localise dans le cytoplasme, le lamellipode, le sillon de division et les fibres de stress, où il contrôle la dynamique du cytosquelette.
• Il est exprimé dans le muscle lisse et divers tissus fœtaux/adultes ; l'isoforme non musculaire 2 est la variante d'épissage prédominante.
• La télokine s'accumule dans les entérocytes intestinaux bien différenciés en réponse au TNF, et l'activité kinase est requise pour la motilité gastro-intestinale et la fonction de barrière épithéliale.
• Les caractéristiques moléculaires clés incluent l'épissage alternatif, la liaison à la calmoduline, la liaison à l'actine, la liaison à l'ATP et l'activité sérine/thréonine-protéine kinase.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le WB, tenez compte du poids moléculaire de 211 kDa ; utilisez des gels SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple 6-8%) et des conditions de transfert optimisées pour les protéines de haut poids moléculaire.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans des lysats de cellules ou de tissus exprimant MYLK, tels que le muscle lisse, les cellules endothéliales ou certaines lignées de cellules cancéreuses.
• Pour l'ELISA, l'appariement avec des anticorps de détection ou des tests de compétition par peptide peut confirmer la reconnaissance de l'épitope ; l'immunogène est un peptide linéaire compris entre les résidus 1800-1900.
• Les méthodes de fixation et de récupération d'antigène peuvent influencer l'immunoréactivité ; testez des conditions adaptées au type d'échantillon.
• Notez que l'épissage alternatif génère des isoformes comme la télokine (~17 kDa) ; confirmez que la bande cible correspond à la forme complète de MYLK lors de l'utilisation du WB.
• La réactivité croisée rapportée est pour l'espèce humaine ; si nécessaire, validez la performance avec des protéines orthologues d'autres espèces.

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