mTOR Lapin pAb - P42345

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de mTOR

• mTOR (Cible mécanistique de la rapamycine) est une sérine/thréonine protéine kinase qui agit comme régulateur central du métabolisme, de la croissance et de la survie cellulaire, intégrant les signaux issus des hormones, des facteurs de croissance, des nutriments, de l'énergie et du stress. Références associées : PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926
• Il exerce ses fonctions au sein de deux complexes distincts : mTORC1 et mTORC2. mTORC1 est sensible aux nutriments et favorise les processus anaboliques comme la synthèse des protéines, des lipides et des nucléotides, tandis que mTORC2 est insensible aux nutriments et régule la prolifération, la survie et l'organisation du cytosquelette en activant les kinases AGC telles que AKT, PKC et SGK1. Références associées : PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:18497260 PMID:21376236 PMID:24670654
• mTORC1 phosphoryle directement les régulateurs traductionnels clés, notamment EIF4EBP1 (4E-BP1) et RPS6KB1 (S6K), augmentant ainsi la traduction de l'ARNm et la biogenèse des ribosomes. Références associées : PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:24403073 PMID:29236692
• mTORC1 régule également la synthèse des lipides via SREBF1 et supprime l'autophagie en phosphorylant ULK1 et d'autres protéines associées à l'autophagie. Références associées : PMID:23426360 PMID:32561715 PMID:20537536
• La phosphorylation d'AKT au niveau du Ser473 médiée par mTORC2 est essentielle pour l'activation complète d'AKT, influençant la survie cellulaire, le métabolisme et la migration. Références associées : PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:21376236 PMID:24670654
• Au niveau sous-cellulaire, mTOR se localise dynamiquement sur les lysosomes, le réticulum endoplasmique, l'appareil de Golgi, les mitochondries, le noyau et les vésicules cytoplasmiques en réponse aux signaux des nutriments et des facteurs de croissance.
• mTOR est largement exprimé dans tous les tissus, avec les niveaux les plus élevés observés dans le testicule.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé est une protéine de fusion recombinante correspondant à la région N-terminale (acides aminés 1-300) de la mTOR humaine. Cette séquence est conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui est cohérent avec la réactivité croisée rapportée.
• Pour le Western blot (WB), attendez une bande d'environ 289 kDa. Utilisez un pourcentage de gel et des conditions de transfert adaptés aux protéines de haut poids moléculaire.
• En immunoprécipitation (IP), l'anticorps peut copurifier mTOR et les composants de son complexe associé ; validez le résultat dans des conditions natives.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), la coloration peut apparaître dans les compartiments cytoplasmique, lysosomal et membranaire selon le type cellulaire et les conditions de culture. Ajoutez des contrôles appropriés.
• Les dilutions et conditions optimales doivent être déterminées de manière empirique pour chaque application et type d'échantillon.

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