Anticorps monoclonal de souris anti-CD3 humain pour la cytométrie en flux - P07766

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la chaîne epsilon du CD3

• CD3E code pour la chaîne epsilon du complexe récepteur des cellules T (TCR)-CD3, un récepteur à sous-unités multiples essentiel à l'activation des lymphocytes T et à l'immunité adaptative. Références associées : PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098
• Lors de l'engagement du TCR, les motifs d'activation basés sur la tyrosine des immunorécepteurs (ITAM) situés dans les queues cytoplasmiques des chaînes CD3 sont phosphorylés par les Src kinases, permettant la signalisation en aval. Références associées : PMID:2470098 PMID:40592325
• Les ITAM du CD3E phosphorylés servent de sites d'ancrage pour la kinase ZAP70, qui est ensuite phosphorylée et convertie en enzyme active, propageant les signaux d'activation des lymphocytes T.
• CD3E est essentiel au bon développement des lymphocytes T, fonctionnant à la fois dans les complexes pré-TCR et TCR matures lors de la sélection des thymocytes.
• La région cytoplasmique du CD3E contient des motifs d'endocytose qui médient l'internalisation et la régulation à la baisse en surface des complexes TCR-CD3, modulant ainsi la réactivité des lymphocytes T. Références associées : PMID:10384095 PMID:26507128
• CD3E fonctionne également comme un récepteur pour ITPRIPL1, qui inhibe l'activation des lymphocytes T en favorisant l'interaction avec NCK1 et en bloquant la cascade de signalisation ERK-NFkB. Références associées : PMID:12110186 PMID:38614099
• La protéine se localise au niveau de la membrane cellulaire en tant que protéine membranaire de type I à passage unique, présentant un domaine extracellulaire de type immunoglobuline et une région cytoplasmique contenant des ITAM.
• CD3E subit des modifications post-traductionnelles clés, principalement la phosphorylation sur tyrosine, qui est centrale à sa fonction de signalisation. Références associées : PMID:2470098 PMID:40592325

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé est une protéine CD3 humaine recombinante ; assurez-vous que votre préparation d'échantillon préserve la conformation native du CD3 pour une liaison optimale de l'anticorps.
• Pour la cytométrie en flux, effectuez un titrage de l'anticorps en utilisant votre population cellulaire spécifique afin de déterminer la concentration de coloration optimale et de minimiser le bruit de fond.
• Validez la réactivité croisée de l'anticorps dans votre système expérimental, car ce clone est spécifique du CD3 humain et pourrait ne pas reconnaître le CD3 d'autres espèces.
• présente une excitation à environ 633 nm ; concevez votre panel multicolore avec des fluorophores compatibles pour éviter le chevauchement spectral.
• Le CD3 est exprimé sur les lymphocytes T matures ; utilisez des stratégies de "gating" appropriées et des colorants de viabilité pour identifier avec précision les sous-ensembles de lymphocytes T vivants.

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