Anticorps monoclonal de souris anti-humain CD15/SSEA-1 conjugué pour la cytométrie en flux - P22083

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'alpha-(1,3)-fucosyltransferase 4 (FUT4)

• L'alpha-(1,3)-fucosyltransferase 4 (FUT4) est une glycosyltransferase résidente de l'appareil de Golgi qui synthétise le déterminant glycanique Lewis X (LeX) (CD15) en transférant un fucose en liaison alpha(1,3) à une N-acétylglucosamine (GlcNAc) sur des chaînes de lactosamine de type 2. Références associées : PMID:1702034, PMID:1716630, PMID:29593094
• Le CD15/LeX est un glycoépitope clé de surface cellulaire impliqué dans l'adhésion cellulaire, la migration et la reconnaissance des cellules immunitaires, notamment via des interactions avec les sélectines (SELE, SELL, SELP) lors du trafic et de l'homing des leucocytes.
• FUT4 travaille conjointement avec FUT7 pour décorer les ligands des sélectines avec des glycannes fucosylés, une étape critique dans la recirculation des lymphocytes et les réponses inflammatoires.
• L'enzyme peut également modifier des accepteurs sialylés pour générer les déterminants sialyl Lewis X et 6‑sulfo sialyl Lewis X, qui servent de ligands à haute affinité pour la même famille de sélectines. Références associées : PMID:1716630, PMID:29593094
• FUT4 se localise exclusivement à la membrane du Golgi médian/trans via une ancre signal N‑terminale, compatible avec son rôle dans le traitement terminal des glycannes.
• L'expression tissulaire comprend les cellules souches mésenchymateuses, les lignées myéloïdes et lymphoïdes, et les promyélocytes immatures, liant ainsi le CD15 à la fois à la différenciation hématopoïétique et à la biologie des cellules souches.
• De plus, FUT4 peut fucosyler des unités LacNAc internes pour former l'épitope VIM‑2, une autre structure liant les sélectines, diversifiant ainsi davantage le répertoire des glycannes de surface cellulaire. Références associées : PMID:11278338, PMID:1716630

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps conjugué est prêt à l'emploi pour la cytométrie en flux directe ; titrer l'anticorps de 0,5 à 5 µg/mL pour déterminer la concentration de marquage optimale pour votre type cellulaire.
• Utiliser des cellules humaines vivantes, non fixées (par exemple, des leucocytes sanguins périphériques ou des lignées cellulaires cultivées) pour préserver l'épitope glucidique natif, car la fixation peut altérer la reconnaissance du CD15.
• Inclure un contrôle isotype approprié et utiliser un blocage des récepteurs Fc pour évaluer la liaison non spécifique.
• Si un marquage intracellulaire du Golgi est requis, les protocoles de perméabilisation doivent être optimisés pour préserver les structures membranaires.

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