Anticorps polyclonal de lapin MonoMethyl-NONO/p54nrb (R357/R365) (Q15233) pour WB, IF/ICC, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NONO/p54nrb

NONO (protéine de liaison à l'octamère ne contenant pas de domaine POU), également connue sous le nom de p54nrb, est une protéine multifonctionnelle liant l'ADN et l'ARN impliquée dans divers processus nucléaires. Elle se lie à l'ADN double et simple brin ainsi qu'à l'ARN, participe à l'épissage des pré-ARNm, probablement sous forme d'hétérodimère avec SFPQ, et interagit avec l'ARNsn U5. NONO est essentielle à la formation des paraspeckles avec PSPC1, et contribue à la réparation de l'ADN via la jonction d'extrémités non homologues (NHEJ) en stabilisant les extrémités de l'ADN avec le dimère Ku70/Ku80.

Dans la régulation transcriptionnelle, NONO forme un complexe avec SFPQ et NR5A1 pour moduler l'activité du promoteur CYP17. Elle régule également l'horloge circadienne en réprimant la transactivation CLOCK-BMAL1, influence l'organisation des synapses GABAergiques et favorise la différenciation neuronale en recrutant TET1 sur des loci génomiques.

NONO joue un rôle critique dans l'immunité innée en s'assemblant dans le complexe HDP-RNP, qui sert de plateforme pour la phosphorylation de IRF3, activant ainsi la voie cGAS-STING en réponse à une infection par un virus à ADN. Lors de l'infection par le VIH-2, NONO interagit avec la protéine de capside virale p24 pour faciliter la détection de l'ADN viral par cGAS.

Au niveau subcellulaire, NONO est principalement nucléaire, se concentrant dans les nucléoles, les speckles nucléaires et les paraspeckles ponctués adjacents aux speckles d'épissage.

NONO est largement exprimée dans le cœur, le cerveau, le placenta, le poumon, le foie, le muscle squelettique, le rein, le pancréas et diverses lignées cellulaires de tumeurs mammaires. La protéine subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la phosphorylation et la méthylation (par exemple, la monométhylation sur R456). Cet anticorps reconnaît spécifiquement la forme mono-méthylée aux arginines 357 et 365.

Références associées : PMID:11525732, PMID:12403470, PMID:26571461, PMID:22416126, PMID:15590677, PMID:11897684, PMID:28712728, PMID:30270045, PMID:9341872, PMID:19608861, PMID:24129315

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps polyclonal de lapin a été produit contre un peptide synthétique portant une monométhylation sur R357 et R365 de NONO/p54nrb humain. Pour le Western blot, une bande autour de 54 kDa est attendue. Validez la spécificité en comparant l'intensité du signal avec une compétition par un peptide non méthylé ou en utilisant des contrôles spécifiques de la méthylation.
• Pour l'IF/ICC, une coloration nucléaire avec enrichissement dans des foyers (paraspeckles) peut être observée. Envisagez une co-coloration avec des marqueurs de paraspeckles (par exemple, PSPC1) pour confirmer la localisation.
• L'anticorps est indiqué comme réagissant avec des échantillons humains et de rat. La réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été testée ; vérifiez dans votre système modèle.
• Les dilutions de travail optimales doivent être déterminées empiriquement pour chaque application. Commencez avec 1:500–1:1000 pour le WB et 1:50–1:200 pour l'IF/ICC, en ajustant si nécessaire.
• L'anticorps est fourni sous forme liquide avec expédition en sac de glace ; conservez à −20°C dès réception. Évitez les cycles répétés de congélation-décongélation.

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