pAb Lapin MonoMethyl-Histone H4-R3 (P62805) | Anticorps prêt pour IF/ICC, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H4

L'histone H4 est l'une des protéines histones centrales qui, avec H2A, H2B et H3, forme le nucléosome – l'unité répétitive fondamentale de la chromatine. Chaque nucléosome consiste en 147 paires de bases d'ADN enroulées autour d'un octamère de deux copies de chacune des quatre histones centrales. Cette structure compacte l'ADN génomique, mais sert également de plateforme dynamique pour réguler l'accessibilité de l'ADN. L'histone H4 joue un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. Ces processus sont étroitement contrôlés par un vaste éventail de modifications post-traductionnelles sur les queues d'histones, collectivement appelées le "code histone", qui orchestrent le remodelage des nucléosomes et le recrutement de protéines effectrices.

L'histone H4 est principalement localisée dans le noyau, où elle est associée aux chromosomes tout au long du cycle cellulaire. Au cours de la spermatogenèse, l'H4 acétylée présente des schémas de localisation nucléaire spécifiques dans les spermatides en élongation.

La queue N-terminale de l'histone H4 est soumise à une grande variété de modifications post-traductionnelles, y compris l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation, la citrullination et bien d'autres. La méthylation des résidus d'arginine est une marque régulatrice clé. La monométhylation sur l'arginine 3 (H4R3me1) est catalysée par des protéines arginine méthyltransférases et a été impliquée dans la régulation transcriptionnelle et l'établissement des états de la chromatine.

Références associées : PMID:11387442, PMID:11448779, PMID:15345777

Étant donné sa haute conservation à travers les espèces, la séquence et les schémas de modification de l'histone H4 sont largement préservés de la levure à l'homme, ce qui soutient la large réactivité croisée de cet anticorps.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps ayant été produit contre un peptide synthétique monométhylé correspondant aux résidus autour de R3 de l'histone H4 humaine, il est censé reconnaître spécifiquement la forme monométhylée de H4R3. Les chercheurs devraient envisager de valider la spécificité en utilisant des tests de compétition avec des peptides ou avec des lignées cellulaires traitées avec des inhibiteurs de méthyltransférase.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), une fixation standard avec du paraformaldéhyde à 4 % suivie d'une perméabilisation avec du Triton X-100 à 0,1–0,5 % est généralement compatible avec la détection des histones. Une contre-coloration nucléaire (par exemple, DAPI) est recommandée pour confirmer la localisation nucléaire du signal.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour détecter des peptides synthétiques H4R3 monométhylés ou des extraits d'histones provenant de cellules. Pensez à optimiser le tampon de revêtement et la dilution de l'anticorps pour votre système de dosage spécifique.
• Il est prévu que l'anticorps réagisse de manière croisée avec l'histone H4 de l'homme, de la souris et du rat, ainsi qu'avec un large éventail d'autres espèces en raison de la forte conservation de la séquence. Cependant, la réactivité croisée doit être validée expérimentalement dans le système d'échantillon pertinent.

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