pAb Lapin MonoMethyl-Histone H4-K20 (P62805) – Anticorps de Recherche Épigénétique pour WB, IHC, IF/ICC, ELISA

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Histone H4

L'histone H4 est un composant central du nucléosome, l'unité de base de la chromatine. Avec les histones H2A, H2B et H3, elle forme un octamère autour duquel l'ADN s'enroule, compactant le génome dans le noyau. Ce rôle structurel est fondamental pour tous les processus utilisant l'ADN comme matrice, y compris la transcription, la réplication, la réparation et la ségrégation des chromosomes.

L'histone H4 se localise principalement dans le noyau et est associée aux chromosomes tout au long du cycle cellulaire. Au cours de la spermatogenèse, des schémas d'acétylation spécifiques peuvent influencer sa localisation nucléaire.

La fonction et les interactions de l'histone H4 sont régulées dynamiquement par une vaste gamme de modifications post-traductionnelles (MPT), souvent appelées le "code histone". Celles-ci incluent l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation, la citrullination, l'ubiquitination et diverses acylations sur de multiples résidus. Ces marques modifient la structure de la chromatine et recrutent des protéines effectrices pour moduler l'expression des gènes, la réponse aux dommages de l'ADN et le remodelage de la chromatine.

Parmi celles-ci, la méthylation de la lysine 20 (H4K20) est une marque épigénétique critique. La monométhylation de H4K20 (H4K20me1) est impliquée dans l'activation transcriptionnelle, la progression du cycle cellulaire et la réponse aux dommages de l'ADN. L'équilibre entre les états de mono-, di- et triméthylation à ce site est étroitement contrôlé par des méthyltransférases et des déméthylases spécifiques.

Cet anticorps a été produit contre un peptide synthétique correspondant à la région entourant K20 de l'histone H4 humaine, portant une modification monométhyle. Il est conçu pour reconnaître spécifiquement uniquement la forme monométhylée de H4K20, ce qui en fait un outil précieux pour disséquer les résultats biologiques distincts des différents états de méthylation de H4K20.

Références associées : UniProt P62805

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• Étant donné que l'histone H4 est hautement conservée chez les eucaryotes, cet anticorps est prédit pour réagir avec de nombreuses espèces. Cependant, la réactivité croisée doit être vérifiée empiriquement pour les systèmes non humains/souris/rat.
• Pour le western blot, enrichissez les protéines histones ou utilisez des méthodes d'extraction acide pour améliorer la détection de H4K20me1, car les histones peuvent être masquées par des protéines non histones abondantes dans les lysats cellulaires totaux.
• Dans les applications de dot blot (DB), incluez des contrôles de peptide non modifié et monométhylé pour confirmer la spécificité de la modification.
• Pour l'immunohistochimie (IHC), des étapes de démasquage antigénique peuvent être nécessaires en raison de l'association étroite des histones avec l'ADN dans les tissus fixés au formol.
• Lors de l'utilisation de l'immunofluorescence (IF/ICC), co-marquez avec un marqueur nucléaire pour confirmer la localisation nucléaire attendue.
• Les protocoles ELISA doivent utiliser des peptides immobilisés ou des extraits d'histones. Assurez-vous que l'antigène de revêtement présente l'épitope K20 monométhylé pour une détection optimale.
• Cet anticorps est spécifique à la monométhyl-K20 et ne détecte pas la K20 di- ou triméthylée ni l'H4 non modifiée, selon la conception de l'immunogène. Néanmoins, validez la spécificité dans votre système d'échantillon en utilisant des contrôles négatifs appropriés (par exemple, des lignées cellulaires avec un état de méthylation H4K20 altéré).

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