Anticorps polyclonal de lapin contre MonoMéthyl-Histone H3-R8 (Q16695/P68431) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3.1t/H3.1

L'histone H3 est un composant central du nucléosome, qui enroule l'ADN en chromatine et limite l'accessibilité pour la transcription, la réplication et la réparation. Les modifications post-traductionnelles (MPT) des queues d'histones constituent un "code histone" qui régule ces processus.
Références associées : UniProt : Q16695, P68431.

Le génome humain code pour plusieurs variants d'H3 : H3.1 est ubiquitaire et codé par plusieurs gènes (H3C1–H3C12), tandis que H3.1t (H3-4/HIST3H3) est spécifique des testicules.
Références associées : UniProt : Q16695.

L'arginine 8 (R8) de la queue N-terminale peut subir une monométhylation (cible de cet anticorps), une diméthylation symétrique (par PRMT5) ou une citrullination. Ces marques influencent les états de la chromatine et l'expression génique.
Références associées : PMID:15345777, PMID:16567635.

L'histone H3 se localise dans le noyau et sur les chromosomes, avec un poids moléculaire prédit d'environ 15 kDa.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique monométhylé autour de l'arginine 8 ; l'anticorps doit détecter principalement H3R8 monométhylé. Vérifiez la spécificité avec des lysats/peptides de contrôle pour exclure une réactivité croisée avec la diméthylation symétrique ou la citrullination au même site.
• Pour le Western blot, l'enrichissement en histones (extraction acide) améliore souvent le signal ; la bande attendue est d'environ 15 kDa.
• En IHC-P, un démasquage antigénique induit par la chaleur et l'utilisation de tissu testiculaire (riche en H3.1t) sont recommandés comme contrôles positifs.
• Pour l'IF/ICC, optimisez la fixation et la perméabilisation car la cible est nucléaire.
• Les tests ELISA peuvent bénéficier de l'ajout d'un étalon de peptide monométhylé pour l'étalonnage.
• Une réaction chez l'humain, la souris, le rat et d'autres espèces est prévue du fait de la conservation de la séquence ; cependant, une validation dans votre système d'échantillon est recommandée.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence entre lots peut varier ; toujours ré-étalonner et valider les nouveaux lots.

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