Anticorps monoclonal de lapin MonoMethyl-Histone H3-R2 (Q16695/P68431) – Validé pour WB, DB, ELISA, CUT&Tag

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3.1/H3.1t

L'Histone H3.1 (et la variante spécifique des testicules H3.1t) sont des composants centraux du nucléosome, l'unité répétitive fondamentale de la chromatine. En tant qu'histones, elles enveloppent et compactent l'ADN, limitant ainsi son accessibilité à la machinerie cellulaire. Les histones jouent un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique.

La régulation dynamique de l'accessibilité de l'ADN est réalisée grâce à un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (MPT) sur les queues d'histones, collectivement appelées le code histone. Ces modifications incluent l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et bien d'autres, et sont reconnues par des protéines "lectrices" spécifiques qui les traduisent en effets biologiques.

L'Histone H3.1 est localisée exclusivement dans le noyau et associée aux chromosomes. Son expression est dépendante de la réplication et fortement enrichie dans les cellules somatiques, tandis que la variante H3.1t (Q16695) est exprimée spécifiquement dans les cellules testiculaires.

La méthylation de l'arginine 2 (R2) de l'histone H3 est une modification clé catalysée par les protéines arginine méthyltransférases (PRMT) telles que PRMT6. Cette modification peut exister sous des états mono- ou diméthylés et est impliquée dans la régulation de la structure de la chromatine et de l'expression des gènes. La forme monométhylée (H3R2me1) est un intermédiaire critique qui peut influencer la liaison des protéines effectrices et est souvent enrichie au niveau des promoteurs de gènes actifs.

Références associées : PMID:17898714 (Méthylation de H3R2 médiée par PRMT6) PMID:18077460 (Méthylation de H3R2 et régulation transcriptionnelle)

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène était un peptide synthétique monométhylé autour de R2 de l'Histone H3 humaine. Pour les applications de Western blot et de dot blot, envisagez d'inclure un contrôle de compétition avec un peptide non méthylé pour confirmer la liaison spécifique à la méthylation.
• Pour les tests CUT&Tag, la spécificité de l'anticorps pour la R2 monométhylée peut permettre une cartographie précise de l'enrichissement en H3R2me1. Validez toujours dans le système d'échantillon pertinent avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• Les conditions de dilution et d'incubation doivent être optimisées empiriquement. L'anticorps peut présenter une réactivité croisée avec des états de méthylation similaires sur d'autres variants de l'histone H3 ; vérifiez si nécessaire avec des extraits protéiques connus.

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