pAb de lapin anti-MonoMéthyl-Histone H3-K9 (Q16695/P68431) pour WB, ChIP-seq, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H3

• L'histone H3 est un composant central du nucléosome, qui enroule et compacte l'ADN en chromatine. Ce rôle structurel est fondamental pour la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431
• Les variants H3.1 et H3.1t (codés respectivement par des gènes tels que H3C1, H3C2, etc., et H3-4) partagent une forte similarité de séquence et se localisent dans le noyau et sur les chromosomes. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431
• H3.1t (Q16695) est spécifiquement exprimé dans les cellules testiculaires, ce qui suggère un rôle spécialisé dans l'organisation de la chromatine au cours de la spermatogenèse. Références associées : UniProt Q16695
• Les histones subissent un large éventail de modifications post-traductionnelles, notamment la méthylation, l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination. La lysine 9 de l'histone H3 (H3K9) est un résidu critique pour la méthylation : les états mono-, di- et triméthylés ont chacun des résultats biologiques distincts. Cet anticorps a été obtenu contre un peptide monométhylé synthétique autour de K9, permettant la détection spécifique de H3K9me1. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431
• La régulation dynamique de la méthylation de H3K9 est impliquée dans la formation de l'hétérochromatine, la répression transcriptionnelle et l'héritage épigénétique. La monométhylation (H3K9me1) est souvent associée aux régions euchromatiennes et à l'activation génique, bien que son rôle fonctionnel puisse varier selon le contexte génomique. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blotting (WB), nous recommandons d'utiliser des lysats enrichis en fraction nucléaire pour améliorer la détection de l'histone H3. Le poids moléculaire prédit est d'environ 15 kDa ; ajustez le pourcentage d'acrylamide du gel et les conditions de transfert en conséquence. Incluez toujours des marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• Lors de l'utilisation de cet anticorps pour des applications basées sur l'immunoprécipitation comme le ChIP et le ChIP-seq, vérifiez la spécificité en incluant des contrôles négatifs (par exemple, peptide non méthylé, ou cellules/tissus dépourvus de la modification) et des contrôles positifs (par exemple, cellules connues pour contenir H3K9me1). L'optimisation de la réticulation et l'efficacité de la fragmentation sont essentielles.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) ou l'immunofluorescence (IF/ICC), envisagez des méthodes de démasquage antigénique et des étapes de perméabilisation pour exposer les épitopes nucléaires. Validez la coloration sur des tissus positifs et négatifs connus.
• Compte tenu de la large réactivité croisée prédite, l'anticorps est censé reconnaître H3K9me1 chez l'homme, la souris, le rat et d'autres espèces. Nous conseillons néanmoins de confirmer la réactivité dans votre système d'échantillon spécifique.

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