Anticorps polyclonal de lapin anti-MonoMethyl-Histone H3-K79 (Q16695/P68431) pour WB, IHC, ChIP

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H3

L'histone H3 est un composant central du nucléosome, l'unité répétitive fondamentale de la chromatine. Avec H2A, H2B et H4, elle emballe l'ADN génomique en structures compactes, régulant ainsi l'accès aux processus utilisant l'ADN comme matrice, tels que la transcription, la réplication, la réparation et la stabilité chromosomique. La modulation dynamique de l'architecture chromatinienne est réalisée grâce à un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles sur les queues et les domaines globulaires des histones, collectivement appelé le "code histone". Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

L'histone H3 se localise principalement dans le noyau et est associée aux chromosomes tout au long du cycle cellulaire. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

Bien que les variants canoniques de l'histone H3 soient exprimés de manière ubiquitaire, certaines isoformes de l'histone H3 présentent des profils d'expression tissu-spécifiques. Par exemple, l'histone H3.1t (H3t), codée par H3-4 (HIST3H3), est principalement exprimée dans les cellules testiculaires. Références associées : UniProt Q16695

L'histone H3 subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment la méthylation, l'acétylation, la phosphorylation, la citrullination et d'autres, sur divers résidus. Parmi celles-ci, la méthylation sur la lysine 79 (K79) est une marque épigénétique conservée, les états de mono-, di- et tri-méthylation étant chacun associés à des fonctions chromatiniennes distinctes. Cet anticorps polyclonal a été développé en utilisant un peptide synthétique monométhylé autour de K79 pour détecter spécifiquement la modification K79me1.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène a été conçu comme un peptide synthétique correspondant à la région entourant la lysine 79 de l'histone H3 humaine, portant un groupe monométhyle sur K79. Cela garantit une réactivité spécifique envers la forme monométhylée ; la réactivité croisée avec les formes non méthylées ou les états de méthylation plus élevés doit être évaluée dans le contexte expérimental.
• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des histones extraites par acide ou des fractions nucléaires enrichies en chromatine pour améliorer la détection, avec une migration protéique typique observée à ~15 kDa.
• En immunohistochimie (IHC-P) et immunofluorescence (IF/ICC), validez l'anticorps dans des conditions de fixation et de démasquage antigénique appropriées pour le tissu ou le type cellulaire d'intérêt.
• Pour l'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) et le séquençage ChIP (ChIP-seq), optimisez la fragmentation et la quantité d'anticorps pour l'échantillon de chromatine spécifique ; l'inclusion de loci génomiques positifs et négatifs pour H3K79me1 est recommandée.
• Dans les tests basés sur ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour confirmer la spécificité du peptide ; validez les performances avec un panel de peptides méthylés et non méthylés.

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