Anticorps Polyclonal de Lapin MonoMethyl-Histone H3-K79 (Q16695 / P68431) pour WB, ELISA, ChIP

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du MonoMethyl-Histone H3

• L'histone H3 est un composant central du nucléosome, enroulant et compactant l'ADN en chromatine. Cette compaction restreint l'accessibilité de l'ADN, régulant ainsi des processus nucléaires fondamentaux incluant la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication et la stabilité chromosomique.
• En tant qu'acteur central du « code histone », H3 subit de nombreuses modifications post-traductionnelles (PTM) spécifiques au site — telles que la méthylation, l'acétylation, la phosphorylation et la citrullination — qui affinent la structure de la chromatine et l'expression des gènes. La monométhylation à la lysine 79 (K79me1) représente une telle marque régulatrice impliquée dans le contrôle transcriptionnel et la mémoire épigénétique.
• L'histone H3 se localise principalement dans le noyau et est un composant intégral des chromosomes. Plusieurs variantes H3 existent chez l'humain : l'H3.1 canonique dépendante de la réplication (codée par plusieurs gènes HIST1H3 et P68431) et l'H3.1t spécifique aux testicules (Q16695), qui est sélectivement exprimée dans les cellules testiculaires.
• La fonction précise de la monométhylation K79 dépend du contexte ; elle a été associée à la fois à des environnements de chromatine active et réprimée, et sa régulation aberrante est liée à des troubles du développement et à des cancers.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• Conception de l'immunogène : L'anticorps a été élevé contre un peptide monométhylé synthétique correspondant aux résidus autour de K79 de l'histone H3 humaine (NP_003520.1), garantissant la spécificité pour la marque K79me1.
• Transfert Western (WB) : Pour la détection, envisagez d'utiliser des extraits de protéines nucléaires ou des histones extraites par acidité. Compte tenu du poids moléculaire prédit d'environ 15 kDa, les protocoles standard SDS-PAGE et de transfert sont adaptés. Testez une gamme de dilutions d'anticorps pour optimiser le rapport signal/bruit.
• ELISA : Utilisez des peptides monométhylés synthétiques et des tampons de blocage appropriés pour minimiser la liaison non spécifique. Incluez des peptides non modifiés et d'autres peptides modifiés comme témoins pour confirmer la spécificité.
• Immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) : Les conditions de réticulation (cross-linking) et la sonication doivent être soigneusement optimisées pour préserver la marque méthylée et obtenir une fragmentation chromatine appropriée. Validez les performances de l'anticorps dans les espèces pertinentes (humain, souris, rat) et le contexte cellulaire.
• Réactivité croisée : L'anticorps est prédit pour réagir avec une large gamme d'espèces en raison de la forte conservation de la séquence de la région H3K79. Validez la spécificité dans votre système expérimental en utilisant des témoins positifs et négatifs appropriés.

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