Anticorps monoclonal de lapin contre MonoMéthyl-Histone H3-K79 (Q16695/P68431) – WB, ChIP, IHC-P, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H3

• L'histone H3 est un composant essentiel des nucléosomes, indispensable à l'empaquetage de l'ADN dans la chromatine. Elle joue un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et le maintien de la stabilité chromosomique. Les modifications post-traductionnelles (PTM) sur l'histone H3, telles que la méthylation, l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitylation, forment un « code histone » dynamique qui module l'accessibilité de la chromatine et l'expression génique.
  Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

• Au niveau sous-cellulaire, l'histone H3 est localisée dans le noyau et sur les chromosomes. Parmi les variants de H3, H3.1t (Q16695) est exprimé principalement dans les cellules testiculaires, tandis que H3.1 (P68431) est codé par un groupe de gènes dépendants de la réplication et représente la forme somatique canonique de H3.
  Références associées : UniProt Q16695 (spécificité tissulaire), UniProt P68431 (localisation sous-cellulaire)

• La lysine 79 (K79) de l'histone H3 est un résidu bien caractérisé qui subit des mono-, di- et triméthylations. Ces états de méthylation exercent des influences régulatrices distinctes sur la structure et la fonction de la chromatine, la K79me1 étant impliquée dans des processus tels que l'élongation de la transcription et la répression télomérique.
  Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431 (modifications annotées au niveau de K79)

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Conception de l'immunogène : L'immunogène est un peptide synthétique monométhylé autour de K79 de l'histone H3 humain. Pour les applications nécessitant une haute spécificité pour K79me1, envisagez d'utiliser de l'histone H3 non modifiée ou des peptides K79 di-/triméthylés comme contrôles négatifs pour confirmer la sélectivité de l'anticorps.
• Western Blotting (WB) : Une bande d'environ 15 kDa est attendue dans les lysats cellulaires totaux d'échantillons humains, de souris ou de rat. Optimisez la dilution de l'anticorps et les conditions d'incubation pour votre type d'échantillon spécifique.
• Immunoprécipitation de la chromatine (ChIP/ChIP-seq) : Cet anticorps est adapté pour la ChIP native ou réticulée. Validez l'efficacité de l'enrichissement par qPCR ou séquençage avec des locus génomiques positifs et négatifs appropriés.
• ELISA et DB : Des essais de liaison directe peuvent être utilisés ; assurez-vous que le peptide de revêtement conserve le statut de méthylation correct.
• Réactivité croisée : Une large réactivité croisée prévue suggère une conservation de l'épitope K79me1 à travers les espèces. Vérifiez les performances chez les espèces moins courantes par des expériences pilotes.
• Conserver et manipuler conformément aux recommandations ; expédié dans des sacs de glace.

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