Ac mAb de Lapin MonoMéthyl-Histone H3-K27 (Q16695/P68431) – Anticorps d'Histone H3 Méthylé pour WB, IF/ICC, ELISA

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Histone H3

• L'histone H3 est un composant central du nucléosome, enroulant et compactant l'ADN en chromatine. Cette structure limite l'accessibilité de l'ADN aux machineries cellulaires, jouant ainsi un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. L'accessibilité de l'ADN est régulée par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles des histones, également appelé code des histones, et par le remodelage des nucléosomes. Références connexes : UniProt Q16695, UniProt P68431

• L'histone H3 se localise dans le noyau et s'associe aux chromosomes. Références connexes : UniProt Q16695, UniProt P68431

• Les isoformes canoniques H3.1 (codées par plusieurs gènes) sont généralement exprimées dans les cellules divisantes, tandis que le variant H3.1t (Q16695) est spécifiquement exprimé dans les cellules testiculaires. Références connexes : UniProt Q16695

• L'histone H3 subit des modifications post-traductionnelles étendues, notamment la méthylation, l'acétylation, la phosphorylation et la citrullination à des résidus spécifiques. La lysine 27 (K27) est un site de modification connu ; son état monométhylé (H3K27me1) est associé à la régulation des gènes. Références connexes : PMID:16567635

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène est un peptide monométhylé synthétique autour de la K27, suggérant une haute spécificité pour la marque H3K27me1. Lors de l'utilisation de l'anticorps, envisagez d'inclure des témoins de peptides méthylés et non modifiés dans des essais de dot blot ou ELISA pour valider la spécificité.
• Pour le Western blotting (WB), des extraits acides enrichis en histones ou des lysats nucléaires totaux sont recommandés. Une quantité de chargement typique de 10 à 20 µg d'extrait nucléaire peut être utilisée, mais une optimisation dans le système d'échantillon pertinent est conseillée.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), la perméabilisation avec du Triton X-100 ou un détergent similaire est nécessaire pour permettre la coloration nucléaire. Le marquage simultané avec un anticorps anti-H3 total peut aider à normaliser les signaux de méthylation.
• La réactivité croisée est prédite sur une large gamme d'espèces en raison de la conservation de la séquence ; cependant, validez toujours l'anticorps dans l'espèce ou le tissu cible s'il n'a pas été testé précédemment.
• Cet anticorps est applicable pour la recherche épigénétique axée sur les modifications des histones et la dynamique de la chromatine ; envisagez son utilisation dans des applications de type ChIP après une validation minutieuse.

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