Anticorps polyclonal de lapin contre Histone H3-K27 monométhylée (H3K27me1) (Q16695/P68431) pour WB, IHC, ChIP et ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H3

• L'histone H3 est un composant central du nucléosome, elle sert d'échafaudage pour l'empaquetage de l'ADN et joue un rôle central dans la régulation de la transcription, de la réplication et de la réparation de l'ADN. Les modifications post-traductionnelles (MPT) de l'histone H3, dont la méthylation sur des résidus lysine spécifiques, constituent un "code histone" dynamique qui régit la structure de la chromatine et l'expression génique. Références associées : PMID:16267050, PMID:17194708
• Au niveau subcellulaire, l'histone H3 est localisée dans le noyau et associée aux chromosomes, aussi bien dans les cellules en interphase qu'en mitose.
• Expression tissulaire : l'histone H3.1 canonique (codée par de multiples gènes dont H3C1, H3C2, etc.) est largement exprimée dans les tissus somatiques, tandis que le variant H3.1t spécifique du testicule (Q16695) présente une expression restreinte aux cellules testiculaires.
• La lysine 27 (K27) de l'histone H3 est un résidu critique pour les modifications post-traductionnelles, dont la citrullination PMID:16567635. La monométhylation de H3K27 (H3K27me1) est l'un des états de méthylation qui influence l'architecture de la chromatine et la transcription. Cet anticorps détecte spécifiquement H3K27me1.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique monométhylé correspondant à la région K27 de l'histone H3 humaine. Lors de l'utilisation de cet anticorps, il est recommandé de réaliser des tests de compétition par peptide pour confirmer la liaison spécifique de la modification.
• Pour une analyse par Western blot (WB), une bande d'environ 15 kDa correspondant à l'histone H3 est attendue. L'utilisation de contrôles de chargement appropriés et de protocoles d'extraction d'histones optimisés peut améliorer la détection.
• Dans les applications basées sur l'immunoprécipitation telles que le ChIP, assurez-vous que la chromatine est suffisamment fragmentée et validez la spécificité de l'anticorps en utilisant des loci génomiques positifs et négatifs (par exemple des régions avec un enrichissement connu en H3K27me1).
• La compatibilité avec de multiples espèces (homme, souris, rat et autres) est prévue sur la base de l'homologie de séquence ; cependant, il est conseillé de valider la réactivité croisée dans l'espèce et le système expérimental concerné.
• Les dilutions de travail optimales pour ELISA, dot blot (DB) et immunohistochimie doivent être déterminées empiriquement par l'utilisateur final.

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