pAb de lapin anti-MICA pour WB, ELISA - Q29983

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MICA

• MICA (séquence A liée au polypeptide du CMH de classe I) est un membre de la famille des MIC, une famille de protéines inductibles par le stress, également appelée MIC-A ou PERB11.1.
• Il agit comme ligand pour le récepteur immunitaire activateur NKG2D/KLRK1, qui est exprimé sur pratiquement toutes les cellules natural killer (NK) humaines, les lymphocytes T γδ et les lymphocytes T αβ CD8+. Références associées : PMID:11491531 PMID:11777960
• L'interaction de NKG2D avec MICA stimule la cytotoxicité médiée par les cellules NK et la production de cytokines, jouant un rôle central dans les réponses immunitaires innées et adaptatives. Références associées : PMID:10426993
• MICA est régulée à la hausse dans des conditions de stress cellulaire, notamment les infections virales et bactériennes, les dommages à l'ADN et le choc thermique, servant ainsi de signal de danger pour le système immunitaire.
• La protéine est principalement localisée sur la membrane cellulaire, mais peut également être trouvée dans le cytoplasme ; elle est largement exprimée dans les tissus à l'exception du système nerveux central, avec une forte expression dans l'épithélium gastrique, les kératinocytes, les cellules endothéliales et diverses tumeurs épithéliales.
• MICA subit plusieurs modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation N-liée, la palmitoylation et la formation de ponts disulfures, et contient un domaine de type immunoglobuline.
• L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes, et la protéine peut être clivée protéolytiquement à partir de la surface cellulaire, générant une forme soluble qui module les réponses immunitaires.
• MICA est impliquée dans la surveillance immunitaire des tumeurs, les troubles auto-immuns et les interactions hôte-virus, ce qui en fait un biomarqueur clé et une cible thérapeutique en oncologie et immunologie.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 24 à 307 (NP_000238.1), ce qui correspond au domaine extracellulaire de la MICA humaine. Cette région est prédite comme exposée et peut présenter des épitopes natifs.
• En Western blotting, on attend une bande d'environ 43 kDa en conditions réductrices ; cependant, en raison de la glycosylation, le poids moléculaire observé peut être légèrement plus élevé. Une validation dans le système d'échantillon concerné est recommandée.
• Pour les applications ELISA, le revêtement avec la protéine recombinante ou l'utilisation d'un format sandwich doit être optimisé ; pensez à utiliser la titration en damier pour déterminer les concentrations optimales d'anticorps et d'antigène.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec l'humain, la souris et le rat, mais ses performances sur d'autres espèces n'ont pas été testées et doivent être validées indépendamment.
• Un blocage standard avec 5 % de lait écrémé ou de BSA est couramment utilisé pour le WB ; si un bruit de fond élevé est observé, essayez d'ajuster l'agent de blocage ou les conditions de tampon.

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