Anticorps Monoclonaux de Lapin anti-MDA5 pour WB, ELISA - Q9BYX4

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du MDA5

• Code pour l'hélicase C à domaine contenant une protéine 1 induite par l'interféron (IFIH1), également connue sous le nom de MDA5, Helicard et RLR-2. C'est un récepteur de l'immunité innée cytoplasmique qui reconnaît l'ARN viral bicaténaire et l'ARNm non coiffé présentant une déficité en méthylation 2'-O.
• Lors de la liaison du ligand, le MDA5 interagit avec MAVS sur les mitochondries, déclenchant la phosphorylation médiée par TBK1/IKBKE et l'activation d'IRF3/IRF7, conduisant à la production d'interféron de type I et de cytokines pro-inflammatoires. Références connexes : PMID:28594402, PMID:32169843, PMID:33727702
• Agit comme un capteur majeur pour les picornavirus (ex: EMCV, rhinovirus), les coronavirus (y compris le SARS-CoV-2) et d'autres virus à ARN tels que la dengue et le virus du Nil occidental. Références connexes : PMID:28606988, PMID:33440148, PMID:33514628
• Se localise dans le cytoplasme, les mitochondries et le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle de capteur d'ARN viral et de transduction du signal.
• Appartient à la famille des récepteurs de type RIG-I (RLR), contenant deux domaines CARD N-terminaux, un domaine hélicase DExD/H-box et un domaine régulateur C-terminal. Le domaine hélicase se lie à l'ARN de manière dépendante de l'ATP.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation et l'ubiquitination, qui régulent son activité et sa stabilité.
• Large expression avec des niveaux plus élevés dans le placenta, le pancréas et la rate ; peu dans le cerveau, les testicules et le poumon.
• Les mutations associées aux maladies dans IFIH1 sont liées au syndrome d'Aicardi-Goutières et au diabète sucré, soulignant son rôle dans l'auto-immunité.
• De plus, le MDA5 pourrait jouer un rôle dans l'inhibition de la croissance et l'apoptose des cellules tumorales et améliorer la fonction des cellules tueuses naturelles (NK).

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène couvre une région C-terminale (aa 900-1000) du MDA5 humain, qui est conservée chez l'humain, la souris et le rat, soutenant la réactivité croisée rapportée. Validez la réactivité spécifique à l'espèce dans les matrices d'échantillons pertinentes.
• Pour le Western blotting, l'anticorps peut détecter des bandes à ~117 kDa (MDA5 pleine longueur) et possiblement à ~25 kDa ; l'utilisation d'une large plage de poids moléculaire et de témoins positifs tels que des cellules HeLa ou A549 traitées à l'interféron est conseillée.
• Dans l'ELISA, titrez l'anticorps contre le MDA5 recombinant ou le peptide d'immunisation pour déterminer les concentrations de travail optimales ; assurez-vous d'un blocage et de lavages appropriés.
• Puisque le MDA5 est inductible par l'interféron, envisagez de stimuler les cellules avec de l'IFN-alpha/bêta ou des mimiques viraux (ex: poly(I:C)) pour augmenter l'expression de la cible avant la lyse.

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