Anticorps monoclonal de lapin anti-MCM5 pour WB, IHC-P, IP, ELISA - P33992

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de MCM5

• Le facteur de licence de la réplication de l’ADN MCM5 est un composant essentiel du complexe MCM2-7, qui agit comme hélicase réplicative indispensable à l’initiation et à l’élongation de la réplication de l’ADN dans les cellules eucaryotes.
  Références associées :
  PMID:40940420

• MCM5 est une sous-unité intégrale du complexe hélicase CDC45-MCM-GINS (CMG), la machinerie moléculaire responsable du déroulement de l’ADN matrice au niveau de la fourche de réplication pendant la phase S.
  Références associées :
  PMID:16899510
  PMID:32453425
  PMID:34694004

• L’activité ATPase de l’anneau MCM2-7 est assurée par six sites actifs formés aux interfaces entre les sous-unités, avec un motif conservé de doigt d’arginine fourni en trans, bien que ces sites contribuent différemment à la fonction hélicase.
  Référence associée :
  PMID:32453425

• Localisée dans le noyau et associée aux chromosomes, MCM5 joue un rôle essentiel pour garantir une seule réplication de l’ADN par cycle cellulaire en participant à l’assemblage du complexe de pré-réplication.

• Les modifications post-traductionnelles de MCM5 comprennent la phosphorylation, l’acétylation et la conjugaison à l’ubiquitine, qui régulent sa fonction et ses interactions protéiques au sein du système de licence de la réplication.

• MCM5 est également connue sous les alias CDC46 et P1-CDC46, reflétant son homologie avec les protéines du cycle de division cellulaire de la levure, et appartient à la famille des hélicases MCM dépendantes de l’ATP.

• Des mutations de MCM5 ont été associées au syndrome de Meier-Gorlin 8 (MGORS8), une maladie caractérisée par un nanisme primordial et une microcéphalie, soulignant son rôle essentiel dans la prolifération cellulaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 635 à 734 de la région C-terminale de MCM5 humain (P33992) ; cet épitope peut être accessible dans des conditions dénaturantes comme natives.
• Pour le western blot, une bande attendue d’environ 82 kDa doit être observée dans les lysats cellulaires totaux de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat ; inclure des marqueurs de poids moléculaire et des contrôles de chargement appropriés.
• En immunohistochimie, il est recommandé d’optimiser les méthodes de récupération antigénique et la dilution de l’anticorps primaire pour les tissus fixés au formol et inclus en paraffine afin d’obtenir une coloration nucléaire spécifique.
• L’anticorps peut être efficace pour l’immunoprécipitation de MCM5 et la co-immunoprécipitation des membres du complexe MCM qui interagissent avec elle ; valider avec des partenaires d’interaction connus.
• Pour l’ELISA, envisager d’utiliser l’anticorps comme réactif de capture ou de détection contre MCM5 recombinant ou des lysats cellulaires ; l’association avec un clone ciblant un épitope non chevauchant peut améliorer les performances du test sandwich.

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