mAb de lapin anti-tryptase des mastocytes pour WB, IHC-P, IP, ELISA - Q15661

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la tryptase des mastocytes

• La tryptase alpha/bêta-1 (codée par TPSAB1) est la principale sérine protéase neutre stockée dans les granules sécrétoires des mastocytes, libérée lors de l’activation et de la dégranulation des mastocytes.
• L’isoforme 2 (également appelée tryptase bêta-1) clive plus efficacement les substrats de grande taille, tels que la fibronectine, que l’isoforme 1, mais semble moins efficace vis-à-vis des petits substrats. Références associées : PMID:18854315
• Le gène TPSAB1 produit plusieurs isoformes (TPS1, TPS2, TPSB1, TPSB2) par épissage alternatif, la tryptase-2 étant l’un des variants.
• La localisation subcellulaire est principalement extracellulaire, la protéine étant sécrétée par les mastocytes.
• Expression tissulaire : l’isoforme 1 prédomine dans les poumons, l’estomac, la rate, le cœur et la peau ; l’isoforme 2 est exprimée dans l’aorte, la rate et les tumeurs du sein, avec les niveaux les plus élevés dans les cellules endothéliales de certains vaisseaux sanguins, et de faibles niveaux dans les mastocytes.
• La protéine possède un peptide signal, subit une glycosylation et contient des ponts disulfure ; elle est classée comme une hydrolase sérine protéase et un zymogène.
• Le poids moléculaire de la protéine mature est d’environ 30,5 kDa, ce qui correspond à la bande observée à 31 kDa dans les applications.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Comme l’immunogène est un peptide synthétique, l’anticorps reconnaît probablement un épitope linéaire ; les conditions dénaturantes en WB peuvent donc convenir.
• Pour l’IHC-P, envisager des méthodes de récupération antigénique adaptées à la détection de la tryptase dans des tissus riches en mastocytes, tels que la peau ou les poumons.
• Pour l’IP, valider la capacité de l’anticorps à précipiter la protéine de 31 kDa dans des conditions non dénaturantes.
• En raison de sa réactivité croisée avec la souris, l’anticorps peut être utilisé dans des modèles murins d’allergie ou de biologie des mastocytes, mais il convient de vérifier la réactivité spécifique à l’espèce.
• Noter que la tryptase peut être libérée sous forme soluble ; l’ELISA peut nécessiter une optimisation de la capture et de la détection.
• L’anticorps est monoclonal, ce qui garantit une bonne uniformité entre les lots ; toujours inclure des contrôles appropriés.

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