MADCAM1 pAb de lapin pour WB, IHC-P, ELISA - Q13477

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MADCAM1

• MADCAM1 (mucosal addressin cell adhesion molecule 1, molécule d'adhésion cellulaire adressine muqueuse 1) est un récepteur d'adhésion cellulaire exprimé sur les veinules muqueuses, qui dirige le trafic des lymphocytes vers les tissus muqueux comme les plaques de Peyer et la lamina propria intestinale.
• Il se lie à la fois à l'intégrine α4β7 et à la L-sélectine, régulant ainsi le passage et la rétention des leucocytes. L'isoforme 2, qui ne possède pas le domaine de type mucine, peut être spécialisée dans le renforcement de l'adhésion dépendante de l'intégrine α4β7, indépendamment de la L-sélectine.
• La protéine est une glycoprotéine transmembranaire de type I appartenant à la superfamille des immunoglobulines, contenant des domaines de type immunoglobuline et une région riche en mucines (dans l'isoforme canonique).
• La localisation subcellulaire est majoritairement au niveau de la membrane plasmique, ce qui est cohérent avec son rôle dans les interactions cellule-cellule.
• Spécificité tissulaire : Forte expression sur les veinules endothéliales hautes (HEV) et les veinules de la lamina propria de l'intestin grêle ; expression plus faible dans le côlon et la rate. Expression très faible dans le pancréas et le cerveau ; absente dans le thymus, la prostate, les ovaires, les testicules, le cœur, le placenta, les poumons, le foie, le muscle squelettique, les reins et les leucocytes sanguins périphériques.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation N-liée et les ponts disulfure, essentiels pour l'intégrité structurelle et la liaison aux ligands. Les mots-clés mentionnent également l'épissage alternatif et la disponibilité d'une structure 3D.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région des acides aminés 100 à 200, une région extracellulaire ; à noter que l'anticorps peut reconnaître MADCAM1 à la fois native et dénaturée, mais l'accessibilité de l'épitope dans les tissus fixés doit être validée.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 40 kDa est attendue dans des conditions réductrices ; utilisez des marqueurs de poids moléculaire adaptés et vérifiez avec un contrôle positif (par exemple, lysat de tissu intestinal humain).
• En IHC-P, la récupération d'antigène (par chaleur ou par enzyme) peut être nécessaire pour exposer l'épitope ; testez plusieurs méthodes de récupération et plusieurs dilutions d'anticorps sur des tissus positifs et négatifs connus.
• Les conditions d'ELISA, comme le tampon de revêtement et le système de détection, doivent être optimisées individuellement ; un test de compétition par peptide peut aider à confirmer la spécificité.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'humain, la souris et le rat ; pour d'autres espèces, réalisez un alignement de séquences et un test préliminaire avant utilisation.

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