Anticorps polyclonal de lapin anti-MAD1/MAD1L1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6D9

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MAD1

• MAD1L1 code pour la protéine du point de contrôle de l'assemblage du fuseau mitotique MAD1, également connue sous le nom de protéine 1 de type déficiente en arrêt mitotique 1, HsMAD1, hMAD1 et protéine de liaison au Tax 181.
• MAD1 est un composant central du point de contrôle de l'assemblage du fuseau (SAC), qui empêche le début de l'anaphase jusqu'à ce que tous les chromosomes soient correctement attachés aux microtubules du fuseau à la plaque métaphasique. Références associées : PMID:10049595, PMID:20133940, PMID:29162720
• Au niveau des kinétochores non attachés, MAD1 forme un complexe hétérotétramérique avec MAD2L1 en conformation fermée (C-MAD2) et catalyse la conversion conformationnelle de MAD2L1 ouverte (O-MAD2) en C-MAD2, une étape clé dans la génération du signal diffusible "wait-anaphase". Références associées : PMID:10049595, PMID:20133940, PMID:29162720
• Dans le cytoplasme, MAD1 peut séquestrer MAD2L1, altérant la fonction du SAC et contribuant à l'instabilité chromosomique dans les carcinomes hépatocellulaires.
• La localisation subcellulaire comprend le noyau, les kinétochores, les centrosomes, les pôles du fuseau et le cytoplasme, reflétant son rôle dynamique pendant la mitose.
• Spécificité tissulaire : MAD1 est exprimée au niveau protéique dans les carcinomes hépatocellulaires et les lignées cellulaires d'hépatome.
• Modifications post-traductionnelles : MAD1 subit une phosphorylation, une acétylation et une conjugaison de type ubiquitine, ce qui peut réguler sa stabilité et son activité.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région centrale (aa 360–700) de MAD1L1 humain, ce qui peut permettre la reconnaissance des produits de clivage possibles ainsi que de la protéine entière ; tenez-en compte lors de l'analyse des profils de bandes en WB.
• Pour le WB, le poids moléculaire prédit est d'environ 83 kDa ; utilisez des contrôles positifs appropriés tels que des lysats de cellules HeLa ou d'autres lignées cellulaires en division active pour confirmer la spécificité.
• Pour l'IF/ICC, une perméabilisation est nécessaire pour accéder à MAD1 localisée au noyau et aux kinétochores ; validez la coloration dans le système d'échantillon pertinent dans des conditions d'arrêt mitotique (par exemple, traitement au nocodazole).
• Les performances en ELISA peuvent dépendre du tampon de revêtement et de la présentation de l'antigène ; envisagez des protocoles ELISA indirects standard avec une protéine MAD1 recombinante comme référence.

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