Anticorps polyclonal de lapin anti-LC3B pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9GZQ8

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de LC3B

• LC3B (Protéine 1 associée aux microtubules chaîne légère 3 bêta), également connue sous le nom d'ATG8F ou MAP1LC3B, est un composant central de la voie de l'autophagie et appartient à la famille des protéines de type ubiquitine ATG8.
• Il fonctionne comme un modificateur de type ubiquitine crucial pour l'élongation des membranes du phagophore lors de la formation de l'autophagosome. Références associées : PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329
• LC3B joue un rôle pivot dans les sous-types d'autophagie sélective tels que la mitophagie, où il ancre les autophagolysosomes aux membranes mitochondriales externes via la liaison à la céramide C-18 après la fission mitochondriale. Références associées : PMID:22922758
• Il favorise la ciliogenèse primaire en médiant l'élimination autophagique d'OFD1 à partir des satellites centriolaires. Références associées : PMID:24089205
• Lors d'un stress nutritionnel, LC3B interagit avec le récepteur de réticulophagie TEX264 pour remodeler les sous-domaines du réticulum endoplasmique en autophagosomes, facilitant le renouvellement du RE. Références associées : PMID:31006537, PMID:31006538
• LC3B recrute directement le facteur de nucléation de l'actine JMY aux membranes du phagophore, stimulant la polymérisation de l'actine et la biogenèse des autophagosomes. Références associées : PMID:30420355
• Au niveau subcellulaire, LC3B se trouve sur les membranes des autophagosomes, les vésicules cytoplasmiques, les membranes mitochondriales et le cytosquelette ; il subit un changement caractéristique de lipidation de LC3B-I cytosolique à LC3B-II lié à la membrane.
• L'expression tissulaire est la plus élevée dans le cœur, le cerveau, le muscle squelettique et les testicules, avec des niveaux plus faibles dans le foie.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène (acides aminés 1-100 de LC3B humain) se situe dans la région N-terminale ; envisagez de confirmer la spécificité de l'anticorps en utilisant des modèles de knockout ou de knockdown de LC3B.
• Pour le Western blot, LC3B apparaît généralement sous forme de deux bandes : une LC3B-I cytosolique d'environ 15 kDa et une LC3B-II lipidée d'environ 14 kDa (forme migrant plus rapidement) dans des conditions réductrices ; les deux formes doivent être prises en compte lors de l'analyse du flux autophagique.
• Dans les applications d'immunofluorescence, les protocoles de fixation et de perméabilisation peuvent nécessiter une optimisation pour révéler une ponctuation de l'autophagosome dans des conditions d'induction de l'autophagie (par exemple, starvation ou traitement pharmacologique).
• Pour l'ELISA, assurez-vous d'utiliser un tampon de revêtement approprié et une dilution correcte de l'anticorps ; validez par rapport à des marqueurs d'autophagie connus dans le système d'échantillon pertinent.

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