Anticorps polyclonal de lapin contre l'histone H3 lactylée (K14) pour WB/ELISA (Q16695/P68431)

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H3

L'histone H3 est un composant central du nucléosome, essentiel pour l'empaquetage de l'ADN dans la chromatine et la régulation de l'accessibilité de l'ADN lors de la transcription, la réparation, la réplication et pour la stabilité chromosomique. Elle forme l'octamère d'histones avec H2A, H2B et H4. Références associées : UniProt Q16695 | UniProt P68431

Deux isoformes majeures représentées par les accès SWISS sont l'histone H3.1t (Q16695), qui est exprimée spécifiquement dans les cellules testiculaires, et l'histone H3.1 canonique (P68431), codée par plusieurs gènes et largement exprimée. Les deux partagent une homologie de séquence élevée, incluant le résidu de lysine 14 qui est la cible de cet anticorps.

L'histone H3 subit un grand nombre de modifications post-traductionnelles (MPT) qui constituent le code histone, influençant l'expression génique et la dynamique de la chromatine. Ces MPT incluent l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation, la citrullination et la lactylation. La lactylation au niveau des résidus lysine a été identifiée sur plusieurs positions de l'histone H3 (par ex. K10, K19, K24, K28, K57, K80), comme rapporté dans des études récentes. Références associées : PMID:31645732

La localisation subcellulaire de l'histone H3 est majoritairement nucléaire, où elle s'associe aux chromosomes tout au long du cycle cellulaire.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène utilisé est un peptide lactylé synthétique autour du K14 de l'histone H3 humaine. Pour confirmer la spécificité de l'anticorps, envisagez l'utilisation d'un peptide non lactylé (témoin) ou réalisez des tests de compétition peptidique.
• Pour le Western blot (WB), l'histone H3 a un poids moléculaire prédit d'environ 15 kDa, mais la préparation de l'échantillon et les conditions de séparation (par ex. extraction acide ou extraits nucléaires à haute concentration saline) peuvent affecter la détection. Validez le test dans le système cellulaire ou tissulaire concerné.
• Pour l'ELISA, assurez-vous que l'antigène lactylé est correctement présenté. Les formats d'ELISA direct ou sandwich peuvent être optimisés en utilisant du peptide ou de la protéine recombinante.
• Bien que l'anticorps soit prédit pour réagir avec une large gamme d'espèces (Humain, Souris, Rat et autres) du fait de la conservation de la séquence autour du site de modification, la réactivité croisée doit être confirmée expérimentalement pour chaque nouvelle espèce ou type d'échantillon.
• La lactylation des histones étant une MPT dynamique, envisagez d'inclure des stimuli métaboliques ou des conditions environnementales appropriés pour enrichir la modification avant l'analyse.

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