Anticorps monoclonal de lapin anti-KRAS+HRAS+NRAS pour WB, IF/ICC, ELISA - P01111 / P01112 / P01116

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Pan-Ras (KRAS/HRAS/NRAS)

• La protéine NRas est une petite GTPase qui fonctionne comme un interrupteur moléculaire dans la voie de signalisation Ras-MAPK, contrôlant la prolifération et la survie cellulaires via le cycle GDP/GTP et son activité GTPase intrinsèque (PubMed:30712867). Références associées : PMID:30712867

• KRAS, HRAS et NRAS sont des membres de la famille classique des Ras, partageant une forte homologie de séquence ; ils régulent divers processus cellulaires en aval des récepteurs aux facteurs de croissance, mais chaque isoforme peut présenter des fonctions distinctes et une expression tissulaire spécifique.

• Au niveau subcellulaire, NRas se localise à la membrane plasmique et à la membrane de l'appareil de Golgi, où il transmet les signaux extracellulaires aux effecteurs intracellulaires.

• Les modifications post-traductionnelles, y compris la farnésylation, la palmitoylation et l'ubiquitination, contrôlent dynamiquement le trafic et la stabilité de NRas ; par exemple, l'ubiquitination médiée par LZTR1 marque NRas pour la dégradation par le protéasome (PubMed:40934300). Références associées : PMID:40934300

• Les mutations de NRAS, KRAS et HRAS qui bloquent les protéines dans l'état lié au GTP sont des événements oncogènes puissants, rendant les anticorps pan-Ras des outils précieux pour la recherche sur le cancer et le développement de diagnostics.

• L'anticorps a été produit contre une région N-terminale conservée (aa 1-100) de NRAS humain, qui est très identique entre les trois isoformes, permettant une détection à large spectre.

Guide expérimental et conseils techniques

• Sur la base de la conception de l'immunogène ciblant l'extrémité N-terminale conservée de NRAS (aa 1-100), l'anticorps est censé détecter KRAS, HRAS et NRAS ; cependant, la réactivité isoforme-spécifique doit être validée en utilisant des protéines recombinantes ou des lignées cellulaires knockout.
• Pour le WB, une bande d'environ 18 kDa est observée en conditions réductrices ; utilisez des contrôles de charge appropriés et confirmez la spécificité par extinction par siRNA ou surexpression.
• En IF/ICC, envisagez de fixer les cellules avec du PFA à 4 % et de les perméabiliser avec du Triton X-100 ; optimisez la concentration d'anticorps pour minimiser le bruit de fond, car les cibles localisées à la membrane peuvent nécessiter une perméabilisation douce.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être associé à des réactifs de détection appropriés ; assurez-vous que le revêtement de la plaque capture l'antigène dans sa conformation native pour une quantification précise.
• Étant donné que la signalisation Ras est finement régulée, incluez des contrôles pour les modifications post-traductionnelles (par exemple, des inhibiteurs de farnésylation) si vous étudiez la translocation membranaire.

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