Anticorps polyclonal de lapin anti-KPNB1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14974

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de KPNB1

• La sous-unité bêta-1 de l'importine (KPNB1), également connue sous le nom de karyophérine bêta-1 ou importine-90, fonctionne comme un récepteur de transport nucléaire, assurant l'importation des protéines soit en association avec un adaptateur importine-alpha, soit de manière autonome en reconnaissant directement les signaux de localisation nucléaire (NLS). Références connexes : PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• Le complexe importine/substrat s'amarre au complexe du pore nucléaire (NPC) par la liaison de KPNB1 aux répétitions FxFG des nucléoporines, suivie d'une translocation dépendante de l'énergie et pilotée par Ran à travers l'enveloppe nucléaire. Références connexes : PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• Côté nucléoplasmique, la liaison de RanGTP dissocie le complexe, libérant le fret ; les sous-unités d'importine sont ensuite recyclées vers le cytoplasme pour les cycles de transport ultérieurs. Références connexes : PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• KPNB1 importe de manière autonome les protéines ribosomiques RPL23A, RPS7 et RPL5, et coopère avec IPO7 pour importer l'histone H1 ; il peut également médier l'importation nucléaire des histones principales H2A, H2B, H3 et H4 in vitro. Références connexes : PMID:11682607, PMID:9687515, PMID:10228156

• Le fret supplémentaire comprend des régulateurs de transcription tels que MRTFA, SNAI1 et PRKCI, soulignant son rôle large dans le transport nucléaire dépendant du signal. Références connexes : PMID:11891849, PMID:19386897, PMID:20818336

• Lors de l'infection par le VIH-1, KPNB1 se lie et médie l'importation nucléaire de la protéine virale Rev, facilitant la réplication virale.

• La protéine se localise principalement dans le cytoplasme et à l'enveloppe nucléaire, ce qui est cohérent avec sa fonction à l'interface nucléocytoplasmique.

• KPNB1 subit des modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la phosphorylation et l'ADP-ribosylation, et l'épissage alternatif produit plusieurs isoformes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB), attendez-vous à une bande près de 97 kDa ; incluez des témoins positifs appropriés (par exemple, lysats de HeLa, HEK293) et envisagez d'utiliser un témoin de chargement pour la normalisation.
• En immunohistochimie (IHC-P), testez les méthodes de récupération de l'antigène (par exemple, tampon citrate, Tris-EDTA) et titrez la dilution de l'anticorps pour minimiser le bruit de fond ; un motif de coloration nucléaire/cytoplasmique est attendu.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), optimisez les conditions de fixation (par exemple, PFA à 4 %) et de perméabilisation (par exemple, Triton X-100 à 0,1 %), et utilisez un anticorps secondaire approprié pour détecter l'anticorps primaire de lapin.
• Les applications ELISA peuvent être réalisées avec un revêtement indirect du peptide immunogène ou de la protéine KPNB1 recombinante ; validez les conditions de l'essai avec des échantillons positifs et négatifs connus.
• Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être confirmée lors du changement de lots dans des études à long terme.

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