Anticorps polyclonal de lapin XIAP validé par KO pour WB, ELISA - P98170

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de XIAP

• XIAP est une protéine multifonctionnelle qui inhibe directement l'apoptose en se liant et en bloquant les sites actifs des caspases-3 et -7, et en maintenant la caspase-9 dans un état monomère inactif.
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• En tant qu'E3 ubiquitine-protéine ligase, XIAP catalyse la polyubiquitination liée à la Lys-63 de RIPK2 en aval de NOD1/2, créant un échafaudage pour l'activation de NF-κB et des kinases MAP, et ubiquitine également RIPK1, MAP3K2 et d'autres médiateurs de signalisation pour ajuster précisément les voies inflammatoires et de survie.
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• XIAP participe à l'homéostasie du cuivre en ubiquitinant COMMD1 pour sa dégradation protéasomale et en augmentant l'activité du chaperon CCS vis-à-vis de SOD1, régulant ainsi le métabolisme cellulaire du cuivre.
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• Il régule positivement la signalisation Wnt en ubiquitinant les co-répresseurs transcriptionnels TLE, entraînant leur dissociation de TCF/LEF et permettant l'activation des programmes transcriptionnels pilotés par la β-caténine.
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• XIAP supprime la formation du ripoptosome et la mort cellulaire dépendante de la caspase-8 en ubiquitinant RIPK1 et la caspase-8.
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• La protéine se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau.

• Elle est exprimée de manière ubiquitaire, à l'exception des leucocytes sanguins périphériques ; détectée au niveau protéique dans les cryptes coliques.
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• XIAP appartient à la famille des inhibiteurs de l'apoptose (IAP) et contient trois domaines BIR et un domaine doigt RING C-terminal ; il est soumis à des phosphorylations régulatrices, des S-nitrosylations et des modifications de type ubiquitine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (résidus 198‑497) couvre les domaines BIR2, BIR3 et une partie du domaine RING, qui sont très conservés chez l'homme, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée. Envisagez de vérifier la réactivité croisée dans votre système modèle spécifique en incluant des contrôles appropriés.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 57 kDa est attendue ; optimisez le blocage et la dilution de l'anticorps en utilisant un lysat d'une lignée cellulaire avec une expression confirmée de XIAP (par exemple HeLa ou Jurkat). Grâce à la validation par KO, cet anticorps offre une haute spécificité ; néanmoins, validez-le dans votre propre dispositif expérimental.
• Bien que l'anticorps soit référencé pour l'ELISA, ses performances peuvent dépendre de la présentation de l'antigène ; envisagez d'utiliser la protéine XIAP recombinante ou des lysats cellulaires comme antigène de revêtement et validez les conditions du test.
• XIAP intervient dans plusieurs voies de signalisation (NF‑κB, Wnt, apoptose) ; lors de l'étude de son rôle, utilisez des stimuli appropriés (par exemple TNFα, ligands NOD1/2) et des inhibiteurs pour disséquer les effets spécifiques de chaque voie.

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