[Validé KO] RAG2 Lapin pAb pour WB, ELISA - P55895

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de RAG2

• Composant central du complexe RAG, un complexe multiprotéique qui médie la phase de clivage de l'ADN lors de la recombinaison V(D)J, assemblant un répertoire diversifié de gènes d'immunoglobulines et de récepteurs des cellules T dans les lymphocytes B et T en développement.
• RAG2 est requis pour toutes les activités catalytiques connues médiées par RAG1 au sein du complexe RAG, agissant probablement comme un capteur de l'état de la chromatine qui recrute le complexe vers l'histone H3 triméthylée sur la Lys-4 (H3K4me3).
• La recombinaison V(D)J implique un mécanisme de clivage de l'ADN en deux étapes : une coupure initiale en amont de l'heptamère, suivie d'une réaction de transestérification directe générant des extrémités codantes en épingle à cheveux et des extrémités de signal brut 5'-phosphorylées.
• Le complexe RAG joue également un rôle dans l'exclusion allélique des cellules B précurseurs, appliquant la clonalité et l'expression monospécifique du récepteur d'antigène des cellules B en repositionnant le second allèle d'immunoglobuline vers l'hétérochromatine péricentromérique.
• Se localise exclusivement dans le noyau, cohérent avec son rôle dans la recombinaison de l'ADN et l'interaction avec la chromatine.
• Exprimé spécifiquement dans les cellules des lignées lymphocytaires B et T.
• Contient des domaines à doigt de zinc et lie les ions métalliques ; classé comme régulateur de la chromatine impliqué dans la recombinaison de l'ADN et associé au déficit immunitaire combiné sévère (SCID).

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 351-527 de RAG2 humain ; cette région peut conférer une réactivité inter-espèces mais doit être validée dans votre échantillon cible, surtout si vous utilisez des systèmes non humains/souris.
• Pour le Western blotting, envisagez d'utiliser des extraits nucléaires de lignées cellulaires B ou T (ex: Jurkat, Raji) comme témoins positifs, avec un poids moléculaire prédit d'environ 59 kDa.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une optimisation de l'antigène de revêtement et des conditions de détection ; la nature polyclonale de l'anticorps peut fournir un signal robuste mais peut aussi présenter un fond dans les échantillons complexes.
• Puisque l'expression de RAG2 est restreinte aux lymphocytes en développement, assurez-vous que votre système expérimental contient les populations cellulaires appropriées ; les cellules induites ou primaires peuvent nécessiter une manipulation soigneuse.

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