[Validé par KO] pAb de lapin anti-HK1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P19367

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Hexokinase-1 (HK1)

• HK1 (Hexokinase-1) est une enzyme d'environ 102 kDa qui catalyse la phosphorylation des hexoses, principalement du D-glucose en glucose-6-phosphate, la première étape et l'étape limitante de la glycolyse (PubMed:1637300, PubMed:25316723, PubMed:27374331). Références associées : PMID:1637300 PMID:25316723 PMID:27374331
• L'enzyme phosphorylate également d'autres hexoses tels que le D-glucosamine, le D-fructose, le D-mannose et le 2-désoxy-D-glucose, mais pas la N-acétyl-D-glucosamine (PubMed:27374331). Références associées : PMID:27374331
• Au-delà de la glycolyse, HK1 fonctionne comme un récepteur de reconnaissance de motifs pour le peptidoglycane bactérien, reliant le métabolisme du glucose à l'activation immunitaire innée. Lorsque la N-acétyl-D-glucosamine bactérienne est libérée dans le cytosol, elle inhibe HK1 et favorise sa dissociation de la membrane mitochondriale externe, déclenchant l'activation de l'inflammasome NLRP3 (PubMed:27374331). Références associées : PMID:27374331
• HK1 se localise principalement à la membrane mitochondriale externe mais se trouve également dans le cytosol, où ses fonctions métaboliques et immunitaires sont compartimentées.
• Il existe plusieurs isoformes spécifiques aux tissus : l'isoforme 2 est spécifique aux érythrocytes, tandis que les isoformes 3 et 4 sont spécifiques aux testicules (PubMed:10978502). Références associées : PMID:10978502
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler l'activité enzymatique et la localisation subcellulaire.
• Les variantes génétiques de HK1 sont associées à des maladies telles que la maladie de Charcot-Marie-Tooth, l'anémie hémolytique héréditaire, le handicap intellectuel, la neurodégénérescence, la neuropathie et la rétinite pigmentaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande à environ 102 kDa. Envisagez d'utiliser des conditions réductrices et un temps de transfert suffisant en raison de la grande taille de la protéine.
• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 21–219), qui est conservée chez l'humain, la souris et le rat, ce qui soutient une large réactivité croisée entre les espèces.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) et l'immunofluorescence (IF/ICC), notez que HK1 est principalement mitochondriale ; des motifs de coloration mitochondriale sont à attendre. Une récupération de l'antigène et une perméabilisation peuvent être nécessaires.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), validez la liaison de l'anticorps dans des conditions natives et incluez des contrôles d'isotype appropriés.
• L'anticorps a été validé par knockout ; néanmoins, incluez toujours des témoins positifs et négatifs dans votre système expérimental pour confirmer la spécificité.

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