[Validé KO] Anticorps polyclonal de lapin anti-ERK2 pour WB, IF/ICC, ELISA - P28482

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ERK2

• L'ERK2, codée par le gène MAPK1, est également connue sous le nom de protéine kinase 1 activée par les mitogènes, kinase 2 régulée par le signal extracellulaire, isoforme p42 de la MAP kinase et MAPK2. C'est une sérine/thréonine kinase essentielle à la cascade de transduction du signal MAPK/ERK, fonctionnant aux côtés de l'ERK1 (MAPK3) en réponse à divers stimuli.
• L'ERK2 médie un large éventail de processus cellulaires, notamment la croissance cellulaire, l'adhésion, la survie, la différenciation, la régulation de la transcription, la traduction, les réarrangements du cytosquelette et l'apoptose, par phosphorylation de plus de 160 substrats identifiés. Ces substrats comprennent des facteurs de transcription (par exemple, ATF2, ELK1, FOS), des éléments du cytosquelette, des régulateurs de l'apoptose et des régulateurs de la traduction. Références connexes : PMID:35831023
• Au-delà de son activité kinase, l'ERK2 agit comme un répresseur transcriptionnel qui se lie à une séquence d'ADN consensus [GC]AAA[GC], réprimant les gènes induits par l'interféron gamma tels que CCL5, IRF7 et STAT1. Cette fonction répressive est indépendante de son activité kinase.
• À l'échelle subcellulaire, l'ERK2 se localise dans le cytoplasme, le cytosquelette (y compris le fuseau, le centre organisateur des microtubules et le centrosome), le noyau, les cavéoles membranaires et les adhérences focales, reflétant son implication dans des processus cellulaires dynamiques.
• L'ERK2 fait l'objet de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation (critique pour son activation), l'acétylation et la conjuguaison de type ubiquitine, qui régulent son activité, sa stabilité et sa localisation subcellulaire.
• La kinase phosphoryle spécifiquement PGK1 dans des conditions hypoxiques, le dirigeant vers les mitochondries et supprimant la formation d'acétyl-CoA à partir du pyruvate. Références connexes : PMID:26942675

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps polyclonal de lapin a été élevé contre un peptide synthétique couvrant les acides aminés 200 à 300 de l'ERK2 humaine (NP_002736.3). Les chercheurs peuvent envisager de vérifier la réactivité dans leur système d'échantillonnage spécifique, en particulier lors de l'utilisation de modèles non humains, non souris ou non rats.
• Pour les applications de Western blot (WB), il est recommandé d'utiliser des témoins positifs et négatifs appropriés, y compris des lysats validés par knockout, pour confirmer la spécificité de la bande au poids moléculaire attendu (~41 kDa).
• Dans les expériences d'immunofluorescence/ICC, les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées, car l'ERK2 transite entre le cytoplasme et le noyau en fonction de l'état de stimulation ; l'utilisation d'une privation de sérum et d'une stimulation par des facteurs de croissance peut aider à visualiser la localisation dépendante de l'activation.
• Pour l'ELISA, le couplage avec un anticorps de capture/détection approprié peut améliorer la sensibilité ; il est conseillé aux utilisateurs d'optimiser les conditions d'enrobage et de blocage pour leur analyte cible.
• En tant que réactif polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être surveillée ; des mesures de contrôle qualité de routine sont suggérées pour les études à long terme.

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