[Validé KO] Anticorps monoclonal lapin contre CDK5 - Q00535

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CDK5

• La kinase dépendante des cyclines 5 (CDK5) est une sérine/thréonine-protéine kinase dirigée vers la proline, également connue sous le nom de kinase 5 dépendante de la division cellulaire, sous-unité catalytique de la tau protéine kinase II ou PSSALRE.
• CDK5 est essentielle à l'arrêt du cycle cellulaire et à la différenciation des neurones, et joue un rôle critique dans la survie neuronale, la migration, la croissance axonale et des neurites, la synaptogenèse et la plasticité synaptique.
• La kinase est activée par liaison aux sous-unités régulatrices CDK5R1 (p35) et CDK5R2 (p39), principalement dans les neurones postmitotiques, et phosphoryle un large éventail de substrats dont MAPT/TAU, MAP2, p53, HDAC1 et les petites GTPases.
• Dans le noyau, CDK5 phosphoryle des facteurs de transcription tels que MEF2, p53 et CLOCK, régulant l'expression génique, l'apoptose et les rythmes circadiens.
• La localisation subcellulaire de CDK5 comprend le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire, le péricaryon, les lamellipodes, les cônes de croissance, la densité post-synaptique et les synapses.
• Une activité anormale de CDK5, souvent induite par le fragment protéolytique p25, est impliquée dans la neurodégénérescence et la lissencéphalie, comme le montrent les principales associations pathologiques.
• Exprimée de manière ubiquitaire, avec une accumulation particulièrement élevée dans les neurones corticaux ; également présente dans les testicules, le muscle squelettique, le côlon, la moelle osseuse et l'ovaire.
  Références associées : PMID:17009320, PMID:19693690

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps est validé par KO, ce qui le rend très adapté pour confirmer le knockout du gène CDK5 dans des lignées cellulaires ou des tissus ; envisagez d'utiliser des lysats d'échantillons sauvages et knock-out comme contrôles positifs/négatifs.
• Pour le Western blot, une bande unique autour de 33 kDa est attendue dans des conditions réductrices ; validez les marqueurs de poids moléculaire et chargez des quantités de protéine appropriées.
• En immunofluorescence (IF-P), CDK5 peut se localiser dans le cytoplasme, le noyau ou la membrane selon le type cellulaire et les conditions ; optimisez la fixation et la perméabilisation pour les cultures neuronales.
• Pour IHC-P, les méthodes de récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps doivent être déterminées empiriquement ; testez sur des tissus contrôles positifs tels que le cerveau ou le muscle squelettique.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter des tampons de revêtement et des systèmes de détection optimisés ; réalisez des expériences de titration pour établir les concentrations de travail.

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