Anticorps polyclonal de lapin anti-VRK1 validé par KO pour WB, IHC-P, ELISA - Q99986

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de VRK1

• Identité de la protéine : VRK1 (Vaccinia-related kinase 1) est une sérine/thréonine-protéine kinase largement exprimée, codée par le gène VRK1 (Gene ID : 7443) chez l'homme. Elle appartient à la famille des kinases VRK et contient des domaines catalytiques et régulateurs conservés.
• Régulation de la chromatine : VRK1 contrôle l'organisation de la chromatine en phosphorylant l'histone H3 sur Thr-4 et l'histone H2AX, un processus critique pour la condensation nucléaire, la progression mitotique et l'expression des gènes. Références associées : PMID:31527692 PMID:37179361
• Réponse aux dommages à l'ADN : En réponse aux lésions de l'ADN, VRK1 phosphoryle KAT5, augmentant son activité histone acétyltransférase et son association à la chromatine, et modifie également TP53BP1 pour orchestrer la signalisation de réparation. Références associées : PMID:33076429 PMID:31527692
• Phosphorylation des substrats et contrôle transcriptionnel : VRK1 phosphoryle p53 sur Thr-18, perturbant son interaction avec MDM2 et stabilisant p53, tout en activant ATF2 et JUN pour moduler la transcription des gènes. Références associées : PMID:10951572 PMID:15105425 PMID:31527692
• Assemblage des corps de Cajal : VRK1 se localise dans les corps de Cajal et phosphoryle la coiline, une étape essentielle à l'intégrité et à la fonction des corps de Cajal dans le traitement de l'ARN. Références associées : PMID:21920476 PMID:31090908
• Désassemblage de l'appareil de Golgi : Pendant la mitose, la phosphorylation de VRK1 médiée par PLK3 déclenche la fragmentation de l'appareil de Golgi, facilitant le partitionnement égal des organites dans les cellules filles. Références associées : PMID:19103756
• Expression tissulaire et liens avec les maladies : Fortement exprimée dans le foie fœtal, les testicules et le thymus, les mutations de VRK1 sont liées à des troubles neurodégénératifs et à des neuropathies périphériques, soulignant son rôle dans le maintien neuronal.

Guide expérimental et conseils techniques

• Conception de l'immunogène : L'anticorps a été généré contre un fragment recombinant (aa 257-396) situé dans la région C-terminale de la VRK1 humaine. Cette région présente une conservation modérée entre les espèces ; vérifier l'homologie de séquence si vous l'utilisez avec des échantillons non humains.
• Western blot : Attendez-vous à une bande spécifique d'environ 45 kDa. Pour une confiance accrue, incluez un lysat de cellules knockout (KO) comme contrôle négatif et un contrôle positif exprimant VRK1.
• Considérations pour l'IHC-P : Les méthodes standard de démasquage antigénique (par exemple, tampon citrate, pH 6.0) sont généralement adaptées. Optimisez la dilution de l'anticorps et incluez des coupes tissulaires avec une expression connue de VRK1 (par exemple, testicule, thymus) comme contrôles positifs.
• Optimisation de l'ELISA : Utilisez une protéine ou un peptide VRK1 recombinant comme antigène de revêtement. Titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale et validez avec les réactifs de blocage et de détection appropriés.

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