Anticorps Monoclonal Lapin Anti-Von Hippel Lindau/VHL Validé KO pour WB, ELISA - P40337

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de Von Hippel Lindau/VHL

• pVHL est un composant de reconnaissance de substrat du complexe ligase E3 VCB-Cul2, assurant l'ubiquitination dépendante de l'oxygène des protéines cibles pour leur dégradation par le protéasome.
• Il ubiquitine spécifiquement les sous-unités alpha du facteur inductible par l'hypoxie (HIF1A, HIF2A) en normoxie, entraînant la dégradation de HIF et la répression des gènes répondant à l'hypoxie. Références connexes : PMID:10944113, PMID:17981124
• VHL module également la signalisation mTORC1 en favorisant l'ubiquitination et la dégradation de RPTOR, et régule la dégradation du récepteur adrénergique ADRB2 de manière dépendante de l'oxygène. Références connexes : PMID:19584355, PMID:34290272
• À l'échelle subcellulaire, VHL se localise dans le cytoplasme, la membrane cellulaire, le réticulum endoplasmique et le noyau, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la dégradation des protéines et le contrôle transcriptionnel.
• La protéine est exprimée dans le cerveau et le rein fœtaux et adultes, et des mutations associées à la maladie sont liées au syndrome de von Hippel-Lindau, à l'érythrocytose congénitale et au cancer.
• Mots-clés : Suppresseur de tumeur, initiation alternative, épissage alternatif, variant de maladie.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser une SDS-PAGE réductrice et un transfert sur membrane PVDF ou nitrocellulose. Le poids moléculaire prédit est d'environ 24 kDa, utilisez donc un gel de 10 à 12 % pour une résolution optimale.
• Validez la spécificité de l'anticorps en utilisant des lignées cellulaires avec knockout du VHL ou des échantillons avec knockdown par ARNsi dans des cellules humaines, de souris ou de rat, compte tenu de la réactivité croisée.
• Pour l'ELISA, cet anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; l'appariement avec un anticorps monoclonal d'une clonalité différente peut améliorer la sensibilité dans les formats ELISA sandwich.
• Optimisez la dilution de l'anticorps dans le système d'essai pertinent ; les dilutions de départ typiques pour le WB sont de 1:500 à 1:2000, mais un titrage empirique est recommandé.

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