[KO validé] Anticorps monoclonal de lapin anti-TRIM25 pour WB, ELISA - Q14258

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de TRIM25

• TRIM25, également connu sous les noms EFP, RNF147 ou ZNF147, est une ligase E3 de l’ubiquitine/ISG15 appartenant à la famille des protéines à motif tripartite (TRIM). Références associées : PMID:16352599
• Il agit comme un médiateur essentiel de l’immunité antivirale innée en catalysant la polyubiquitination liée à Lys-63 des capteurs d’ARN viral RIG-I et IFIH1, ce qui entraîne la production d’interférons. Références associées : PMID:17392790, PMID:29357390, PMID:30193849, PMID:23950712
• TRIM25 régule également divers substrats, notamment 14-3-3 sigma (SFN) par ISGylation, ZFHX3 par dégradation protéasomique, ainsi que le facteur antiviral ZAP/ZC3HAV1 par ubiquitination afin d’améliorer sa liaison à l’ARNm. Références associées : PMID:16352599, PMID:17069755, PMID:22452784, PMID:28060952, PMID:28202764
• Dans le noyau, TRIM25 favorise la reprise des fourches de réplication de l’ADN bloquées en ubiquitinant l’hélicase BLM, un processus médié par l’échafaudage KHDC3L-OOEP.
• TRIM25 inhibe l’autophagie en ubiquitinant et en dégradant le récepteur de cargaison p62/SQSTM1. Références associées : PMID:40542578
• La protéine est principalement localisée dans le cytoplasme, mais elle s’accumule également dans les granules de stress et le noyau.
• TRIM25 est exprimé de manière ubiquitaire, avec des niveaux protéiques élevés détectés dans les tumeurs du sein.
• Elle subit des processus d’acétylation et de phosphorylation et contient les domaines caractéristiques RING, B-box et coiled-coil.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 100–200 de TRIM25 humain. Cette région devrait être accessible et permettre une bonne reconnaissance de l’épitope ; toutefois, validez l’anticorps dans votre type d’échantillon spécifique.
• Cet anticorps est validé pour les applications de Western blot (WB) et d’ELISA. Pour le WB, envisagez d’utiliser des lysats témoins positifs provenant de lignées cellulaires ou de tissus humains exprimant TRIM25. Grâce à sa validation par KO, il présente probablement une grande spécificité ; confirmez l’efficacité de l’inhibition dans votre système.
• Compte tenu de l’implication de TRIM25 dans l’immunité innée, le traitement des cellules avec des mimétiques viraux (par exemple, poly(I:C)) ou des interférons peut moduler les niveaux d’expression, qui peuvent être évalués à l’aide de cet anticorps.
• Pour l’ELISA, envisagez d’utiliser la protéine TRIM25 recombinante ou des lysats cellulaires comme antigène de revêtement. Optimisez la dilution de l’anticorps en fonction des conditions spécifiques du test.

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