[Validé KO] Anticorps monoclonal de lapin anti-Smad3 pour WB, IHC-P, IP, ChIP, ELISA - P84022

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Smad3

• Le membre 3 de la famille SMAD (SMAD3), également connu sous le nom de Mothers against decapentaplegic homolog 3 (MADH3) ou hMAD-3, est codé par le gène SMAD3 et fonctionne comme un SMAD régulé par un récepteur (R-SMAD) dans la voie de signalisation TGF-bêta.
• Agit comme un transducteur de signal intracellulaire et un modulateur transcriptionnel : après activation par les kinases du récepteur de type 1 du TGF-bêta ou de l'activine, il forme un complexe avec SMAD4 et transloque dans le noyau pour réguler la transcription des gènes cibles.
• Se lie à l'élément TRE dans les promoteurs des gènes répondant au TGF-bêta et peut former un complexe SMAD3/SMAD4/JUN/FOS sur les sites AP-1/SMAD pour réguler finement la transcription.
• Effectue un navette entre le cytoplasme et le noyau ; principalement cytoplasmique en l'absence de ligand et s'accumule dans le noyau lors de l'activation de la voie (PMID : non disponible).
• Régule la chondrogenèse et l'ostéogenèse, inhibe la cicatrisation précoce des fractures osseuses et module la cicatrisation des plaies en affectant la croissance/migration des kératinocytes et la chimiotaxie des monocytes de manière sensible aux hormones.
• Soumis à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation, l'ADP-ribosylation et l'ubiquitination, qui contrôlent son activité, sa stabilité et ses interactions ; il contient également des domaines de liaison au zinc essentiels pour la liaison à l'ADN.
• Plusieurs isoformes sont produites par épissage alternatif, contribuant à la diversité fonctionnelle.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 100-200 du Smad3 humain (NP_005893.1). Cette région est conservée, ce qui explique la réactivité croisée de l'anticorps avec le Smad3 de souris et de rat.
• Pour le Western blot (WB), une bande à environ 48 kDa est attendue. Incluez des contrôles de chargement appropriés et des marqueurs de poids moléculaire pour confirmer la taille de la bande.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les conditions de récupération de l'antigène (par exemple, récupération d'épitope induite par la chaleur) peuvent nécessiter une optimisation en fonction du type de tissu et de la méthode de fixation.
• L'anticorps a été validé pour l'immunoprécipitation de chromatine (ChIP) ; l'utilisation de locus de contrôle positifs et négatifs pour la liaison de Smad3 est recommandée pour assurer la spécificité.
• Convient également pour l'immunoprécipitation (IP) et l'ELISA. Les utilisateurs finaux doivent titrer l'anticorps pour déterminer la dilution optimale pour leurs systèmes expérimentaux spécifiques.

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