[Validé KO] Anticorps monoclonal de lapin anti-SIRT1 pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q96EB6

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la SIRT1

• La SIRT1 est une protéine déacétylase dépendante du NAD qui couple la régulation transcriptionnelle à l'état énergétique cellulaire, influençant la progression du cycle cellulaire, la réponse aux dommages à l'ADN, le métabolisme, l'apoptose et l'autophagie. Références associées : PMID:11672523 PMID:12006491 PMID:14976264

• Elle module la structure de la chromatine en déacétylant les histones H1, H2A, H3 et H4, favorisant la répression transcriptionnelle et la formation d'hétérochromatine silencieuse, en particulier au niveau des loci d'ADNr. Références associées : PMID:15469825 PMID:18485871

• La SIRT1 déacétyle une multitude de facteurs de transcription et de corégulateurs, notamment p53, FOXO3, NF-κB et MYC, régulant ainsi les réponses au stress, la survie cellulaire et la prolifération. Références associées : PMID:11672523 PMID:12006491 PMID:14976264 PMID:15152190 PMID:21807113

• Agissant comme un capteur du rapport intracellulaire NAD+/NADH, la SIRT1 médie les adaptations métaboliques lors de la restriction calorique, améliore la gluconéogenèse hépatique et favorise l'oxydation des acides gras dans le muscle squelettique. Références associées : PMID:15205477 PMID:15692560 PMID:23142079

• La SIRT1 participe à la réparation des dommages à l'ADN en déacétylant des protéines clés de réparation telles que Ku70, NBN et WRN, et facilite le recrutement des facteurs de réparation sur les sites endommagés. Références associées : PMID:15205477 PMID:16998810 PMID:17334224 PMID:20097625

• Elle joue un rôle dans l'autophagie en déacétylant ATG5, ATG7 et LC3, et contribue au maintien du rythme circadien via la déacétylation de BMAL1 et PER2. Références associées : PMID:18296641 PMID:18662546

• Au niveau subcellulaire, la SIRT1 est principalement nucléaire, enrichie dans les corps nucléaires PML, mais peut également se transloquer dans le cytoplasme et les mitochondries dans des conditions spécifiques.

• Exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, la SIRT1 est impliquée de manière critique dans la différenciation du muscle squelettique, le développement neuronal et la protection cardiovasculaire.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est une protéine SIRT1 humaine recombinante de pleine longueur ; par conséquent, l'anticorps peut reconnaître tous les isoformes. Pour la validation KO, assurez-vous que l'exon ciblé est bien disrupté dans votre modèle de knock-out.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande majeure à ~82 kDa. Utilisez des contrôles positifs et négatifs appropriés, y compris des lysats de cellules KO si disponibles, pour confirmer la spécificité.
• En immunofluorescence et IHC, une coloration nucléaire est attendue ; cependant, les conditions de perméabilisation et de fixation peuvent nécessiter une optimisation en raison de la localisation de l'antigène.
• L'expression de la SIRT1 est ubiquitaire, mais les niveaux peuvent varier ; envisagez d'utiliser des contrôles de charge et de valider l'anticorps dans votre type de tissu/cellule d'intérêt avant les dosages quantitatifs.
• Cet anticorps est indiqué pour la cytométrie en flux (intracellulaire) ; assurez une perméabilisation adéquate et incluez un contrôle isotype.

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