[KO validé] Anticorps polyclonal de lapin anti-SEC61B pour WB, IF/ICC, ELISA - P60468

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de SEC61B

• La protéine de transport protéique sous-unité bêta de Sec61 (SEC61B) est un composant essentiel du complexe translocon formant le canal SEC61, situé dans la membrane du réticulum endoplasmique (RE). Références associées : PMID:12475939
• Le complexe SEC61 fonctionne à la fois comme récepteur des ribosomes et comme pore régulé, permettant la translocation cotraductionnelle des polypeptides naissants contenant un peptide signal dans la lumière du RE. Références associées : PMID:12475939
• SEC61B participe également à l'insertion des protéines transmembranaires dans la membrane du RE, en assurant l'insertion des premiers segments transmembranaires, tandis que les segments suivants utilisent le complexe translocon multipasse (MPT). Références associées : PMID:32820719, PMID:36261522
• Elle coopère avec la protéine de translocation TRAM1 pour faciliter l'importation des protéines naissantes dans le RE. Références associées : PMID:19121997
• La localisation subcellulaire est limitée à la membrane du RE, ce qui est cohérent avec son rôle dans la translocation des protéines.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation, la palmitoylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler sa fonction ou son association membranaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre la région N-terminale (aa 1 à 96) de la SEC61B humaine ; l'anticorps devrait détecter les formes non modifiées et modifiées à proximité de l'extrémité N-terminale.
• En Western blot, SEC61B migre à environ 10 kDa ; il est conseillé d'utiliser des gels à pourcentage élevé (par exemple, 12 à 15 %) et des conditions de transfert optimisées (par exemple, des membranes pour les faibles poids moléculaires et des temps de transfert courts).
• Pour l'immunofluorescence/ICC, un profil de marquage similaire à celui du RE est attendu ; inclure des étapes de perméabilisation (par exemple, avec 0,1 % de Triton X-100) afin de permettre l'accès de l'anticorps à la protéine membranaire.
• Les applications ELISA peuvent utiliser des fragments recombinants de SEC61B ou des antigènes peptidiques ; confirmer l'efficacité du revêtement et la spécificité de l'anticorps à l'aide de contrôles appropriés.
• Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal, la cohérence entre les lots doit être validée ; utiliser des lignées cellulaires knockout ou des essais de blocage par peptide pour confirmer la spécificité de la cible.

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