[Validé par KO] Anticorps polyclonal de lapin anti-PML pour WB, IHC-P, ELISA - P29590

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PML

• Encodée par le gène PML, la protéine PML est également connue sous le nom de ligase protéique SUMO-E3 PML, protéine de la leucémie promyélocytaire, protéine 71 à doigt de RING et protéine 19 contenant un motif tripartite (TRIM19). Elle appartient à la famille TRIM et contient un domaine à doigt de RING, une boîte B, une région enroulée en hélice (coiled-coil) et un domaine C-terminal soumis à un épissage alternatif, générant plusieurs isoformes aux fonctions distinctes.
• Agit comme la protéine d'échafaudage essentielle des corps nucléaires PML (PML-NBs), des structures sous-nucléaires dynamiques qui régulent la suppression tumorale, le contrôle transcriptionnel, l'apoptose, la sénescence, les réponses aux dommages de l'ADN et la défense antivirale en recrutant et modulant de nombreuses protéines partenaires via des interactions médiées par SUMO.
• Inhibite l'export nucléaire de l'ARNm médié par EIF4E en réduisant l'affinité de liaison d'EIF4E pour la coiffe m7G en 5' des ARNm cibles, contrôlant ainsi l'expression génique au niveau post-transcriptionnel. Références connexes : PMID:11500381 PMID:11575918 PMID:18391071
• Fonctionne comme une ligase protéique SUMO-E3 qui catalyse la conjugaison de SUMO aux protéines substrats, y compris les protéines virales immédiates précoces, et présente une robuste activité de sumoylation dépendante des isoformes (en particulier les isoformes PML-3 et PML-6). Références connexes : PMID:20972456 PMID:28250117
• Plusieurs isoformes (PML-1 à PML-14) présentent des localisations subcellulaires distinctes : les isoformes nucléaires (par exemple, PML-4) se localisent dans les PML-NBs et le nucléoplasme, tandis que les isoformes cytoplasmiques (par exemple, PML-14) s'associent au réticulum endoplasmique et aux membranes des endosomes précoces, permettant une signalisation dépendante du contexte dans la voie TGF-bêta et d'autres voies.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la SUMOylation (essentielle pour la formation des PML-NB), la phosphorylation et l'acétylation, qui modulent sa stabilité, ses interactions et ses fonctions de suppression tumorale.
• Exhibe une large activité antivirale contre les virus à ADN et à ARN (par exemple, herpèsvirus, rage, grippe, VHC) par des mécanismes spécifiques aux isoformes tels que la séquestration de la capside virale, l'inhibition de la synthèse d'ARNm/protéine virale et l'induction de l'apoptose dans les cellules infectées.
• Joue un rôle central dans la sénescence cellulaire et l'apoptose en régulant positivement la stabilité et l'activité de p53/TP53, et en réprimant la transcription de TBX2 via le complexe RBL2/E2F4, liant ainsi PML à l'arrêt permanent de la croissance.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 300-600 de PML humaine (isoforme 1), une région centrale censée détecter plusieurs isoformes ; envisagez de vérifier la réactivité dans votre système modèle spécifique en raison de l'épissage alternatif.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 98 kDa, mais les isoformes et les espèces SUMOylées peuvent apparaître à des poids moléculaires plus élevés ; l'utilisation d'un échelle de protéines de haute qualité et l'optimisation des conditions de transfert sont recommandées.
• Cet anticorps est validé pour la confirmation par KO (knockout) ; assurez-vous d'inclure des lysats de contrôle KO appropriés dans les expériences WB pour confirmer la spécificité de la bande.
• Pour IHC-P, les conditions de récupération de l'antigène (par exemple, tampon citrate pH 6,0 ou EDTA pH 9,0) doivent être optimisées, et il est conseillé de valider les motifs de coloration par rapport à la distribution connue des PML-NB dans les tissus.
• Dans les applications ELISA, envisagez d'utiliser l'immunogène recombinant comme témoin positif pour établir la sensibilité et la plage linéaire.

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