[Validé KO] Anticorps monoclonal de lapin anti-PML pour WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P29590

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PML

• La protéine PML, également connue sous le nom de TRIM19, est un membre de la famille des motifs tripartites (TRIM) et agit comme une ligase E3 SUMO-protéine, jouant un rôle central dans l'assemblage des corps nucléaires PML (PML-NB) et médiant la sumoylation des protéines cibles.
• La PML inhibe l'export nucléaire des ARNm médié par EIF4E en réduisant l'affinité d'EIF4E pour la coiffe 5' m7G, contribuant à sa fonction de suppresseur de tumeur. Références associées : PMID:11500381 PMID:11575918 PMID:18391071
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes (par exemple, PML-1 à PML-14), qui présentent des localisations sous-cellulaires et des spécialisations fonctionnelles distinctes ; les isoformes nucléaires sont impliquées dans le remodelage de la chromatine et la régulation des gènes, tandis que les isoformes cytoplasmiques médient la signalisation TGF-bêta et restreignent la réplication virale.
• La PML est principalement localisée dans le noyau où elle forme les PML-NB, mais peut également être trouvée dans le nucléoplasme, le cytoplasme, la membrane du réticulum endoplasmique et la membrane de l'endosome précoce, selon l'isoforme et le contexte cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles telles que la sumoylation, l'acétylation et la phosphorylation sont critiques pour la dynamique des PML-NB et les interactions fonctionnelles de la PML, influençant son rôle dans l'apoptose, le rythme circadien et les réponses antivirales.
• La PML agit comme une ligase E3 SUMO-protéine, sumoylant des substrats viraux et cellulaires pour réguler l'immunité innée antivirale. Références associées : PMID:20972456 PMID:28250117
• La PML présente une large activité antivirale contre les virus à ADN et à ARN, y compris le virus de l'herpès simplex, la grippe A, la rage et l'hépatite C, souvent en séquestrant les protéines virales dans les PML-NB et en inhibant la réplication virale.
• En tant que suppresseur de tumeur, la PML régule des voies de signalisation clés en modulant l'activité de p53, RB1, AKT, PTEN et mTOR, contribuant à la suppression de la croissance et à la sénescence.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1-185 de la PML humaine, couvrant la région N-terminale qui inclut les domaines doigt à zinc RING et B-box ; tenez-en compte lors de la conception d'expériences pour détecter des isoformes spécifiques.
• Pour le Western blot, une bande à ~98 kDa est attendue ; cependant, en raison des multiples isoformes et de la sumoylation, des bandes supplémentaires peuvent être observées. Validez avec des contrôles appropriés, en particulier lorsque vous utilisez des lignées cellulaires knock-out.
• En immunofluorescence, la PML montre typiquement un motif de coloration nucléaire ponctué caractéristique des corps nucléaires PML ; une co-localisation avec des marqueurs comme SP100 peut confirmer la spécificité.
• Pour l'immunohistochimie, validez sur des échantillons de tissus humains et optimisez les conditions de démasquage antigénique pour assurer une coloration nucléaire robuste. Notez que l'expression de la PML peut être faible dans certains tissus normaux.
• Cet anticorps a été validé pour les études de knock-out ; incluez des contrôles knock-out appropriés pour confirmer la spécificité dans votre système d'échantillonnage.
• Lors de l'utilisation pour l'immunoprécipitation ou l'ELISA, considérez la réactivité de l'anticorps avec la PML dénaturée vs. native et les épitopes conformationnels potentiellement dépendants de la SUMO.

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