[Validé KO] Anticorps polyclonal Anti-PKA RIIα (PRKAR2A) - P13861

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PKA RIIα (PRKAR2A)

• PRKAR2A code pour la sous-unité régulatrice de type II-alpha de la protéine kinase dépendante de l'AMPc (PKA), l'une des quatre isoformes régulatrices qui modulent l'activité de la PKA.
• Lors de la liaison à l'AMPc, la sous-unité régulatrice se dissocie des sous-unités catalytiques, ce qui leur permet de phosphoryler les cibles en aval de la cascade de signalisation de l'AMPc.
• Les chaînes régulatrices de type II fixent la PKA sur des sites subcellulaires spécifiques en interagissant avec les protéines d'ancrage de la kinase A (AKAP), comme la kinase MAP2, facilitant ainsi la signalisation localisée.
• L'expression de PRKAR2A varie d'un tissu à l'autre ; les quatre types de sous-unités régulatrices présentent des distributions tissulaires distinctes et peuvent être régulées de manière constitutive ou inductible.
• La protéine se localise dans le cytoplasme et sur la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec sa fonction dans la signalisation compartimentée par l'AMPc.
• Le gène PRKAR2A subit un épissage alternatif, et la protéine est soumise à des réactions d'acétylation et de phosphorylation, avec un poids moléculaire calculé d'environ 45,5 kDa (UniProt).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante couvrant les acides aminés 1 à 404 de PRKAR2A humain, conçue pour produire des anticorps dirigés contre de multiples épitopes ; cela peut améliorer la sensibilité dans toutes les applications et chez différentes espèces.
• Pour le Western blot, une gamme de dilution initiale de 1:500 à 1:2000 est souvent adaptée ; confirmez la spécificité à l'aide de lysats de knock-out (KO), cet anticorps ayant été validé par KO.
• Compte tenu de sa réactivité avec la souris et le rat, cet anticorps peut être envisagé pour des études interespèces ; cependant, validez les niveaux d'expression dans votre système modèle.
• En immunofluorescence/immunocytologie (IF/ICC), optimisez les protocoles de fixation et de perméabilisation, car la protéine se localise à la fois dans le cytoplasme et sur la membrane.
• Pour l'ELISA, cet anticorps peut être utilisé comme réactif de détection ; il est recommandé de l'associer à un anticorps de capture adapté, et une optimisation standard du test est conseillée.

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