Anticorps polyclonal de lapin anti-PHD2/EGLN1 validé par KO pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9GZT9

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PHD2/EGLN1

• Egl nine homolog 1 (EGLN1), communément appelé PHD2, est une prolyl hydroxylase du facteur inductible par l'hypoxie (HIF) et le principal capteur d'oxygène dans des conditions normoxiques.
• PHD2 catalyse l'hydroxylation de résidus proline spécifiques dans les domaines de dégradation dépendants de l'oxygène de HIF1A et HIF2A, conduisant à l'ubiquitination médiée par VHL et à la dégradation protéasomale.
• Sous hypoxie, l'activité de PHD2 est réduite, permettant la stabilisation de HIFα, sa translocation nucléaire et l'activation transcriptionnelle de gènes impliqués dans l'angiogenèse, l'érythropoïèse et l'adaptation métabolique.
• L'enzyme appartient à la famille des dioxygénases EGLN et contient un motif doigt de zinc ; elle nécessite du fer, du 2-oxoglutarate et de l'ascorbate comme cofacteurs pour sa fonction catalytique.
• De multiples isoformes sont produites par épissage alternatif, et des modifications post-traductionnelles telles que l'acétylation, la phosphorylation et la S-nitrosylation ont été rapportées.
• Au niveau subcellulaire, PHD2 se localise principalement dans le cytoplasme mais peut également être détecté dans le noyau.
• PHD2 est largement exprimé, avec les niveaux les plus élevés dans le muscle squelettique, le cœur, le cerveau et le rein ; il est également trouvé dans les cardiomyocytes, les cellules endothéliales aortiques et le muscle lisse des artères coronaires.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant à la région N-terminale (aa 1-100) du PHD2 humain ; envisagez d'utiliser un peptide bloquant pour les contrôles de spécificité.
• Pour le Western blot, une gamme de dilution de départ typique est de 1:500 à 1:2000 ; validez la dilution optimale dans votre système d'échantillons et notez une bande attendue à ~46 kDa.
• Pour l'IHC-P, une récupération antigénique peut être nécessaire ; testez des protocoles à base de citrate ou d'EDTA et incluez des contrôles positifs appropriés (par exemple, tissu cardiaque ou musculaire squelettique).
• Pour l'IF/ICC, les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées ; PHD2 est détecté dans le cytoplasme et le noyau.
• L'anticorps a été validé dans des échantillons KO ; incluez toujours des contrôles knockout ou knockdown lors de l'étude de la spécificité de la cible.

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