[Validé KO] Anticorps polyclonal de lapin anti-PAK2 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q13177

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du PAK2

• PAK2 est une sérine/thréonine-protéine kinase impliquée dans la régulation du cytosquelette, la motilité cellulaire, la progression du cycle cellulaire, l'apoptose et la prolifération. Références associées : PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:19273597
• Il agit comme un effecteur en aval des petites GTPases CDC42 et RAC1 ; la liaison des GTPases actives déclenche un changement conformationnel et l'autophosphorylation. Références associées : PMID:7744004
• Le PAK2 de pleine longueur favorise la survie et la croissance cellulaires, tandis que le clivage médié par la caspase produit le fragment pro-apoptotique p34 qui transloque dans le noyau et active la voie JNK. Références associées : PMID:7744004, PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:9171063
• PAK2 phosphorylate divers substrats, notamment MAPK4/6, JUN, l'histone H4 (facilitant l'assemblage des nucléosomes), BAD, la protéine ribosomique S6 et CASP7. Références associées : PMID:21317288, PMID:21177766, PMID:21724829, PMID:21555521, PMID:27889207
• Outre son activité catalytique, PAK2 se lie à ARHGEF7 et GIT1 pour réguler l'orientation du fuseau lors de la mitose. Références associées : PMID:19273597, PMID:19923322
• La protéine se localise dans le cytoplasme, le noyau, la région périnucléaire et les membranes.
• Exprimé de manière ubiquitaire, avec des niveaux plus élevés observés dans le muscle squelettique, l'ovaire, le thymus et la rate.
• PAK2 subit l'acétylation, la myristoylation et l'ubiquitination ; c'est une enzyme allostérique avec une activité de liaison à l'ATP, également connue sous le nom de p58, PAK65, gamma-PAK et PAK-2.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blotting (WB), le poids moléculaire prédit du PAK2 de pleine longueur est d'environ 58 kDa ; dans des conditions apoptotiques, le fragment clivé d'environ 34 kDa peut être observé. Assurez-vous d'inclure les témoins appropriés.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), PAK2 présente un marquage cytoplasmique et nucléaire, avec un possible enrichissement dans les régions périnucléaires et les membranes.
• Pour l'ELISA, l'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1–212) ; la combinaison avec des anticorps contre d'autres épitopes peut permettre le développement d'un ELISA sandwich.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée ; envisagez d'utiliser des lignées cellulaires avec knockout du PAK2 comme témoins négatifs pour confirmer la spécificité de vos dosages.
• Un blocage standard et une optimisation de la dilution (par exemple, en commençant à 1:500 pour le WB) sont recommandés ; des tests empiriques dans le système d'échantillon pertinent sont essentiels.

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