Anticorps monoclonal anti-MLH1 validé par KO pour WB, IHC-P, ELISA - P40692

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de MLH1

• La protéine de réparation des mésappariements de l’ADN Mlh1 (homologue 1 de la protéine MutL) est la sous-unité catalytique du système de réparation des mésappariements de l’ADN après réplication (MMR). Elle forme l’hétérodimère MutL alpha avec PMS2 et l’hétérodimère MutL gamma avec MLH3.
• MutL alpha est recruté au niveau de l’ADN présentant des mésappariements par les complexes MutS alpha (MSH2-MSH6) ou MutS beta (MSH2-MSH3) ; il active ensuite l’endonucléase PMS2 afin d’introduire des cassures de brin, déclenchant l’élimination et la réparation des mésappariements.
• MLH1 se localise principalement dans le noyau et est associée aux chromosomes au cours des processus de réplication et de réparation de l’ADN.
• Elle est exprimée dans plusieurs tissus, notamment le côlon, les lymphocytes, le sein, le poumon, la rate, les testicules, la prostate, la thyroïde, la vésicule biliaire et le cœur.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation, la phosphorylation et la conjugaison à l’ubiquitine, lesquelles peuvent réguler sa stabilité et sa fonction.
• MLH1 est classée comme un suppresseur de tumeur ; les mutations germinales sont associées au cancer colorectal héréditaire sans polypose (HNPCC), également appelé syndrome de Lynch.

Recommandations expérimentales et conseils techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 350 à 450 de la protéine MLH1 humaine ; la spécificité de l’épitope doit être vérifiée pour les applications prévues.
• Pour le Western blot, l’anticorps détecte une bande d’environ 85 kDa ; validez le résultat à l’aide de lysats cellulaires humains ou murins présentant une expression connue de MLH1 et incluez des contrôles knockout lorsqu’ils sont disponibles.
• En immunohistochimie (IHC-P), optimisez les conditions de récupération antigénique et le titrage ; comparez les profils de coloration avec la distribution tissulaire connue et utilisez des coupes de tissus knockout comme contrôles négatifs.
• Pour l’ELISA, associez cet anticorps à un réactif de détection approprié et validez-le à l’aide de la protéine MLH1 recombinante afin d’établir la sensibilité et la spécificité.

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