[KO Validé] Anticorps polyclonal de lapin anti-MAPKAPK3 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q16644

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MAPKAPK3

• La protéine kinase activée par la MAP kinase 3 (MAPKAPK3), également appelée kinase du chromosome 3p (3pK), est une sérine/thréonine kinase activée par le stress, codée par le gène MAPKAPK3 chez l'homme.
• Elle joue un rôle clé dans la production de cytokines, l'endocytose, la migration cellulaire, le remodelage de la chromatine et la régulation transcriptionnelle. En réponse au stress, elle est phosphorylée et activée par p38-alpha/MAPK14, ce qui entraîne la phosphorylation de ses substrats.
• MAPKAPK3 partage une redondance fonctionnelle avec MAPKAPK2, présentant la même spécificité de substrat, mais son activité kinase et ses niveaux d'expression sont plus faibles. Toutes deux phosphorylent des substrats tels que HSP27/HSPB1, KRT18, KRT20, RCSD1, RPS6KA3, TAB3 et TTP/ZFP36.
• La protéine se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme, ce qui lui permet d'intervenir dans divers processus de signalisation.
• Elle est largement exprimée dans les tissus, avec des niveaux plus élevés dans le cœur et le muscle squelettique ; elle est absente dans le cerveau. Elle est également exprimée dans l'épithélium pigmenté rétinien. Références associées : PMID:26744326
• Elle est impliquée dans les réponses inflammatoires en régulant la production de TNF et d'IL6 au niveau post-transcriptionnel, par phosphorylation de protéines se liant aux éléments riches en AU comme TTP/ZFP36, modulant ainsi la stabilité et la traduction des ARNm.
• Elle est nécessaire à la macropinocytose induite par les TLR aigus dans les cellules dendritiques, via la phosphorylation et l'activation de RPS6KA3, et agit également comme modulateur de la répression médiée par le Polycomb.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation et l'acétylation ; la protéine contient un domaine kinase de liaison à l'ATP et est classée comme transférase.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1-240) de MAPKAPK3 humaine, ce qui peut favoriser la reconnaissance de la protéine pleine longueur (~43 kDa) en Western blotting. Pensez à inclure des contrôles positifs et négatifs appropriés dans votre expérience.
• Le poids moléculaire prédit est de 43 kDa ; en WB, on attend une bande proche de cette taille. Validez le résultat dans votre système d'échantillon spécifique, car des modifications post-traductionnelles ou des isoformes peuvent entraîner de légers décalages.
• Pour l'IF/ICC, notez que MAPKAPK3 se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme ; optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour préserver l'antigénicité. Un contre-colorant nucléaire est recommandé.
• En ELISA, l'immunogène recombinant (aa 1-240) peut servir de contrôle positif ; cependant, l'adéquation de l'anticorps pour l'ELISA sandwich doit être validée avec des anticorps appariés.
• La réactivité croisée est prédite pour l'homme, la souris et le rat sur la base de l'homologie de séquence ; vérifiez les performances si vous l'utilisez pour d'autres espèces.

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