[KO Validé] Anticorps monoclonal de lapin anti-LAMP2 pour WB, IHC-P, IF/ICC, FC, ELISA - P13473

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de LAMP2

• LAMP2 (glycoprotéine membranaire associée aux lysosomes 2) est une protéine transmembranaire de type I fortement glycosylée, également connue sous le nom de CD107b ou LGP-96. Trois isoformes principales (LAMP-2A, -2B et -2C) sont produites par épissage alternatif, chacune ayant des distributions tissulaires et des rôles distincts dans la fonction lysosomale.
• Elle joue un rôle essentiel dans la biogenèse des lysosomes, la régulation du pH lysosomale et l'autophagie. LAMP2 inhibe directement le canal à protons TMEM175, facilitant l'acidification lysosomale requise pour une activité hydrolase optimale. Références associées : PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:37390818
• LAMP2 est un récepteur central de l'autophagie médiée par les chaperonnes (CMA). Elle se lie aux protéines substrats (par exemple GAPDH, GPX4, NLRP3) qui ont été reconnues par la chaperonne HSC70, et les cible pour dégradation lysosomale, notamment en condition de jeûne. Références associées : PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:36586411
• Pendant la macroautophagie, LAMP2 est nécessaire à la fusion des autophagosomes avec les lysosomes ; les cellules dépourvues de LAMP2 ne parviennent pas à recruter STX17 sur les autophagosomes, empêchant la dégradation de la cargaison autophagique. Références associées : PMID:27628032
• LAMP2 contribue à l'immunité adaptative en facilitant la présentation d'antigènes exogènes médiée par le CMH de classe II ; elle favorise la génération de peptides antigéniques dans le compartiment endosomal/lysosomale. Références associées : PMID:15894275, PMID:20518820
• Pendant l'infection par le virus des oreillons, LAMP2 favorise le clivage médié par FURIN de la protéine de fusion virale F en interagissant à la fois avec FURIN et la protéine virale non traitée.
• LAMP2 se localise principalement sur la membrane du lysosome et, dans une moindre mesure, sur les endosomes, les autophagosomes et la membrane plasmique.
• Expression tissulaire spécifique des isoformes : LAMP-2A est abondante dans le placenta, les poumons et le foie ; LAMP-2B est largement exprimée dans des tissus comme la rate, le thymus, la prostate et les testicules ; LAMP-2C se trouve dans l'intestin grêle, le côlon, le cœur, le cerveau et le muscle squelettique. Références associées : PMID:26856698, PMID:7488019

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond au domaine luminal (acides aminés 29–375) de la LAMP2 humaine, ciblant un épitope extracellulaire accessible dans les échantillons non perméabilisés pour le marquage de surface (par exemple FC) et dans les échantillons perméabilisés pour la détection totale.
• Pour le Western blot, le poids prédit de la protéine core est de 45 kDa, mais une glycosylation N- et O-liée extensive entraîne généralement l'apparition d'une bande large migrant à environ 90–110 kDa ; utilisez un contrôle positif adapté tel qu'un lysat de cellules entières HeLa ou HepG2.
• En immunofluorescence et en IHC, les conditions de fixation/perméabilisation doivent être optimisées pour accéder au compartiment membranaire lysosomale ; envisagez un co-marquage avec des marqueurs lysosomaux (par exemple LAMP1) pour confirmer la localisation.
• Pour la cytométrie en flux, le marquage intracellulaire (FC intra) nécessite une perméabilisation cellulaire ; la compatibilité avec les anticorps secondaires conjugués à la fluorescence et les protocoles de fixation doit être validée dans votre contexte cellulaire spécifique.
• Cet anticorps a été validé pour la confirmation de knock-out ; incluez toujours des contrôles de knock-out ou de knock-down appropriés pour vérifier la spécificité de l'anticorps dans votre essai.

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