[KO Validé] Anticorps monoclonal de lapin anti-LAMP2 pour WB, IHC-P, ELISA - P13473

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de LAMP2

• LAMP2 (glycoprotéine membranaire associée aux lysosomes 2), également appelée CD107b et LGP-96, est une protéine membranaire lysosomale fortement glycosylée. Trois isoformes principales (LAMP-2A, LAMP-2B, LAMP-2C) sont produites par épissage alternatif, chacune ayant une expression tissulaire spécifique et des rôles de régulation distincts.
• Fonction principale : LAMP2 est essentielle pour la biogenèse des lysosomes, la régulation du pH lysosomal (via l'inhibition directe de TMEM175) et l'autophagie, en particulier l'autophagie médiée par les chaperonnes (CMA). Elle se lie aux protéines ciblées par les chaperonnes (par ex. GAPDH, GPX4, NLRP3) et les dirige vers la dégradation lysosomale. (PubMed:11082038, PubMed:18644871, PubMed:24880125, PubMed:37390818, PubMed:36586411) Références associées : PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:37390818, PMID:36586411
• Facilite la fusion autophagosome-lysosome en favorisant l'accumulation de STX17 sur les autophagosomes, un processus nécessaire à la dégradation autophagique. (PubMed:27628032) Références associées : PMID:27628032
• Joue un rôle essentiel dans la présentation d'antigènes exogènes médiée par le CMH de classe II, mais pas pour les antigènes endogènes, en soutenant la dégradation des protéines lysosomales. (PubMed:15894275, PubMed:20518820) Références associées : PMID:15894275, PMID:20518820
• Infection microbienne : Interagit à la fois avec FURIN et la forme non traitée de la protéine de fusion F du virus des oreillons, facilitant le clivage de la protéine virale médié par FURIN.
• Localisation subcellulaire : Réside principalement dans les membranes des lysosomes, des endosomes tardifs et des autophagosomes ; il circule également vers la membrane cellulaire.
• Spécificité tissulaire : L'isoforme LAMP-2A est fortement exprimée dans le placenta, les poumons et le foie, tandis que LAMP-2B est largement distribué et LAMP-2C est prédominant dans le cœur, le cerveau et le muscle squelettique. (PubMed:26856698, PubMed:7488019) Références associées : PMID:26856698, PMID:7488019
• Les caractéristiques structurelles clés comprennent des liaisons disulfure, une glycosylation N-liée importante, une hélice transmembranaire unique et une queue cytoplasmique courte. Les variants génétiques sont liés à la glycogénose (maladie de Danon).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB), la masse moléculaire prédite est de 45 kDa, mais en raison de la glycosylation étendue, LAMP2 migre généralement à environ 100–120 kDa. Validez l'identité de la bande à l'aide de contrôles knockout ou de extinction génique.
• Lors de la réalisation d'immunohistochimie (IHC-P), envisagez un démasquage antigénique induit par la chaleur (par ex. tampon citrate, pH 6.0) pour démasquer l'épitope et optimiser la coloration.
• Pour l'ELISA, titre l'anticorps et utilisez une paire adaptée ou une détection directe pour déterminer les concentrations de travail optimales ; vérifiez la spécificité avec la protéine LAMP2 recombinante.
• Cet anticorps a été validé à l'aide d'un peptide synthétique du domaine luminal (aa 311-410) ; il reconnaît LAMP2 humain, souris et rat, ce qui le rend adapté aux études interespèces.

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