[Validé KO] Anticorps monoclonal anti-Ki67 pour WB, IF/ICC, IHC-P, mIHC, ELISA - P46013

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Ki67

• Ki-67, codé par le gène MKI67, est également connu sous les noms de KIA, MIB-1 et PPP1R105. C'est une grande protéine nucléaire riche en proline (~359 kDa) qui agit comme un marqueur de prolifération universel.
• Nécessaire pour maintenir les chromosomes mitotiques individuels dispersés dans le cytoplasme après la déseassembly de l'enveloppe nucléaire ; il agit à la fois comme répulsif chromosomique au début de la mitose et comme attracteur chromosomique en fin de mitose. Références associées : PMID:27362226 PMID:32879492 PMID:35513709
• Au début de la mitose, il se relocalise à la surface des chromosomes et forme des structures étendues en forme de brosse qui créent une barrière de charge stérique et électrostatique, agissant comme un tensioactif pour empêcher l'agrégation des chromosomes et permettre une motilité indépendante. Références associées : PMID:27362226
• Pendant l'anaphase, les brosses se replient et Ki-67 devient un attracteur chromosomique : la déphosphorylation expose une zone basique, induisant une séparation de phase liquide-liquide dépendante de l'ARN qui regroupe les chromosomes et exclut les grandes particules du noyau naissant. Références associées : PMID:32879492 PMID:39153474 PMID:28935370
• Se lie à l'ADN avec une préférence pour les séquences superenroulées et riches en AT, contribuant potentiellement à l'organisation de la chromatine. Références associées : PMID:10878551 PMID:24867636
• Se localise sur les chromosomes, dans le noyau et le nucléole pendant le cycle cellulaire.
• La protéine subit des modifications d'acétylation, phosphorylation et ubiquitination qui régulent sa localisation dynamique et sa fonction.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le western blotting, Ki-67 est une protéine de haut poids moléculaire (~359 kDa) ; utilisez un gel à faible pourcentage (par exemple 6 % de SDS-PAGE) et des temps de transfert prolongés pour garantir une détection efficace.
• Validez l'anticorps dans votre système expérimental spécifique, car l'expression de Ki-67 est strictement dépendante du cycle cellulaire et peut varier selon les types cellulaires et les états de prolifération.
• Pour les coupes paraffinées IHC, des méthodes standard de récupération d'antigène (induites par la chaleur, pH 6 ou 9) sont recommandées ; attendez une coloration nucléaire ou nucléolaire dans les cellules prolifératives.
• L'immunogène (aa 1200-1300) se situe dans la région C-terminale de Ki67 humain ; envisagez un alignement de séquence si vous visez une réactivité croisée avec d'autres espèces, car l'anticorps peut reconnaître des épitopes conservés.

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