[KO Validé] Anticorps polyclonal de lapin anti-IDH1 pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - O75874

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de IDH1

• IDH1 code pour l'isocitrate déshydrogénase cytoplasmique dépendante du NADP (IDH1), également appelée IDPc ou oxalosuccinate décarboxylase, qui catalyse la décarboxylation oxydative de l'isocitrate en α-cétoglutarate avec production concomitante de NADPH (PubMed:10521434, PubMed:19935646).
  Références associées : PMID:10521434 PMID:19935646
• L'enzyme nécessite des ions métalliques divalents tels que Mg²⁺ ou Mn²⁺ comme cofacteurs et appartient à la famille des isocitrate/isopropylmalate déshydrogénases, avec des rôles clés dans le cycle de l'acide tricarboxylique et l'homéostasie redox cellulaire.
• IDH1 est principalement localisée dans le cytoplasme et le cytosol, et se trouve également dans les peroxysomes, où elle peut fournir du NADPH pour les réactions peroxysomales telles que l'activité de la phytanoyl-CoA dioxygénase.
• En produisant du NADPH, IDH1 soutient la biosynthèse réductrice, y compris la synthèse lipidique, et aide à maintenir l'environnement réducteur cellulaire contre le stress oxydatif.
• La protéine est soumise à des modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent moduler son activité enzymatique et sa distribution sous-cellulaire.
• IDH1 peut fonctionner comme une cristalline épithéliale cornéenne, contribuant potentiellement au maintien de la transparence cornéenne (Par similarité).
• Le poids moléculaire calculé du monomère mature d'IDH1 est d'environ 46,7 kDa, ce qui correspond à la bande observée autour de 47 kDa en Western blotting.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène englobe la protéine IDH1 humaine complète (aa 1–414), ce qui suggère que l'anticorps peut reconnaître à la fois les conformations natives et dénaturées. Pour le Western blotting, une bande attendue près de 47 kDa doit être observée ; validez avec des contrôles positifs et négatifs appropriés, car cet anticorps est validé par KO.
• En immunoprécipitation (IP), utilisez un protocole standard avec des lysats cellulaires de tissus ou de lignées cellulaires exprimant IDH1. Confirmez la capture par Western blotting avec un anticorps différent ou par spectrométrie de masse.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), attendez un motif de coloration principalement cytoplasmique avec d'éventuels points de peroxisome. Incluez des conditions de fixation et de perméabilisation appropriées, et vérifiez la spécificité en utilisant des cellules contrôles knock-out pour IDH1 si disponibles.
• Cet anticorps a une réactivité croisée avec l'IDH1 de souris et de rat, ce qui le rend adapté aux études sur des modèles de rongeurs. Validez toujours les niveaux d'expression dans le tissu ou le système cellulaire spécifique que vous étudiez.
• Pour l'ELISA, envisagez de l'associer à un anticorps de détection adapté ou d'utiliser l'anticorps à la fois comme capture et détection dans un format sandwich, en assurant une réactivité croisée minimale avec d'autres isoformes d'isocitrate déshydrogénase (par exemple, IDH2, IDH3).

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